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时间:2019-02-02
《荧光定量pcr测定鼻咽癌患者血清中游离的ebv-dna》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、福建医科大学硕士学位论文荧光定量PCR测定鼻咽癌患者血清中游离的EBV-DNA姓名:李振华申请学位级别:硕士专业:临床检验诊断学指导教师:欧启水20090301荧光定量PCR测定鼻咽癌患者血清中游离的EBV-DNA中文摘要【摘要】目的建立FQ—PCR(real.timeFluorescentQuantitativePCR)系统,定量检测鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)患者血清中游离的EBV(EpsteinBarrVirus,EBV)一DNA,探索EBV—DNA用于NPC的诊断、预后判断及疗效判断的价值。方法收集101例鼻咽癌患者和
2、49例正常对照者血清作为检测标本。101例患者中I期3例,II期11例,III期39例,Ⅳ期48例。根据鼻咽癌患者血清中游离的EBV—DNA基因全序列设计引物和探针,PCR扩增EBV-DNABamHI—W基因片段,并将其克隆到pGEM.TEasy载体上,构建质粒标准品;建立FQ.PCR体系。用已建立的荧光定量PCR方法对EBV-DNA含量进行定量检测所有标本。同时采用酶联免疫吸附法测定血清EBV衣壳抗原的IgA抗体(Igh/VCh)。结果1、NPC患者治疗前血清EBV—DNA平均浓度为58400copies/ml和阳性检出率为90.6%(91/101),患者治疗
3、后血清EBV-DNA平均浓度为(1243.36copies/ml,18.75%8/44)和正常人血清EBV—DNA水平平均浓度为Ocopies/ml和检出率分别为096(0/49)。NPC患者治疗前血清EBV—DNA水平显著高于治疗后和正常人(P均<0.01)。NPC患者治疗前血清EBV—DNA阳性检出率显著高于治疗后和正常人(尸均小于0.05)。NPC患者治疗后血清EBV-DNA水平和检出率与正常人比较,差异均无显著意义(Mann—WhitneyU检验,P=O.256:卡方检验,P=O.223)。血清VCA/IgA抗体阳性率为83.1%(84/101)明显高于
4、正常对照组(4.1%,2/49)。鼻咽癌患者EBV—DNA水平阳性率90.6%,同时血清VCA—Igh的阳性率为83.1%,DNA检测灵敏度略高于VCA/IgA检测。2、IⅡ一Ⅳ期鼻咽癌患者的血清EBV—DNA阳性率(89.7%,35/39;89.6%,43/48)较I—II(72.7%8/11)期患者为高,有显著性差异(P<0.01)。NPC患者治疗前血清EBV—DNA水平随临床TNM分期越晚而显著增高。I期为3390±1540copies/ml,II期为11802±5603copies/ml,II]期为56488±27234copies/ml,IV期为722
5、275±321351copies/ml,Kruskal—WallisH检验分析结果显示各临床分期间的鼻咽癌患者血清中游离EBV-DNA的平均拷贝数均有显著性差异(P(O.005)。3、鼻咽癌患者治疗前血清VCA/IgAs/co平均值为3.8158(S/CO>1为阳性,<1为阴性),略高于治疗后平均值3.1261(尸>0.05)差别无显著意义。但明显高于正常对照组0.7318(P6、、m1)(P7、ithnasopharyngealcarcinomaabstract[Abstract]objectiveToconstructquantitativeanalysisofcell-freeEpstein—Barrvirus(EBV)DNAlevelsinseruminnasopharyngealcarcinoma(NPC),InordertoexplorethevaluableofEBV—DNAlevelsintheserumofnasopharyngealcarcinomapatients谢thdiagnose,predictionprognosticati8、on,therapeut
6、、m1)(P7、ithnasopharyngealcarcinomaabstract[Abstract]objectiveToconstructquantitativeanalysisofcell-freeEpstein—Barrvirus(EBV)DNAlevelsinseruminnasopharyngealcarcinoma(NPC),InordertoexplorethevaluableofEBV—DNAlevelsintheserumofnasopharyngealcarcinomapatients谢thdiagnose,predictionprognosticati8、on,therapeut
7、ithnasopharyngealcarcinomaabstract[Abstract]objectiveToconstructquantitativeanalysisofcell-freeEpstein—Barrvirus(EBV)DNAlevelsinseruminnasopharyngealcarcinoma(NPC),InordertoexplorethevaluableofEBV—DNAlevelsintheserumofnasopharyngealcarcinomapatients谢thdiagnose,predictionprognosticati
8、on,therapeut
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