egr1诱骗寡核苷酸下调pdgf抑制原代培养的血管平滑肌细胞增殖

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1、目录一、摘要中文结构式摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文结构式摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5三、论文前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6一刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17四、本研究创新性的自我评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯18五、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19六、附录综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21在学期间科研成绩⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39·中文结构式摘要·Egr一1诱骗寡核苷酸下调PDGF-A抑制原代培养的血管平滑肌细胞增殖目的通过向原代培养的大鼠动脉平滑肌细胞中转染针对早期生长反应因子．1(earlygrowthresponsefactor-1，Egr-1)l拘诱骗寡核苷酸(decoyoligonucleotide，

3、decoyODN)，检测血管平滑肌细胞增殖情况及早期生长反应因子．1、血小板衍生生长因子-A(plateletderivedgrowthfactor，PDGF-A)的表达变化，探讨针对早期生长反应因子．1的诱骗寡核苷酸对体外培养的大鼠平滑肌细胞增殖的影响和作用机制。方法通过组织块贴壁法进行原代大鼠动脉血管平滑肌细胞(VascularsmoorhmusclecellsVSMC)培养、传代培养和鉴定，设计合成Egr-1诱骗、诱骗对照寡核苷酸．转染人工合成的针对Egr—l的decoyODN，将培养的平滑肌细胞分为对照组(正常培养细胞)、诱骗组(转染Egr一1的诱骗寡核苷酸)、诱骗对照组(

4、转染Egr-1诱骗杂码寡核苷酸)．免疫细胞化学染色法检测转染前后平滑肌细胞增殖情况与Egr-1及增殖细胞PDGF-A的表达变化，进行图像分析。所有数据均采用SAS8．0统计软件进行统计分析，计量资料以均值±标准差(茗±S)表示，各组间比较应用单因素方差分析，／K0．05有统计学意义。结果成功进行原代VSMC培养，经细胞鉴定培养细胞为高纯度的血管平滑肌细胞。转染Egr—l诱骗寡核苷酸后，用免疫组织化学法分别观察各组不同时间点的Egr·1和PDGF表达的情况发现：Egr-1在三个实验组中均有表达，诱骗转染组与诱骗对照组和阴性对照组相比，均在一定程度上抑制了Egr-1和PDGF．A表达，

5、经SAS8．0统计软件进行统计分析，证明有统计学意义(尸

6、vascularsmoothmusclecellproliferation■●·●0blectiveLI■BydetectingproliferationofrataorticsmoothmusclecellwhichwastransfectedEgr-1decoyoligonucleotideandEgr-1andPDGF-Aexpression,detectionproliferationofvascularsmoothmusclecell，expressionchangesofearlygrowthresponsefactor-1andplateletderivedgrowt

7、hfactor-A(PDGF)，toapproachtheeffectandmechanismofthedecoyolligonucleotideoftheearlygrowthreSponsefactor-1ontheproliferationofvascularsmoothmusclecells(smc)ofratsinvivo．MethodAfterthecultureoforiginalarterialSMCformratswithtissueexplants