雪旺细胞体外分离培养与和支架材料的生物相容性的研究 (1)

《雪旺细胞体外分离培养与和支架材料的生物相容性的研究 (1)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致调}的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：丝～签字日期：三立年三月型日学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅

2、。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。论文作者签名：指导教师签名：签字日期：銎立年三月丝日雪旺细胞体外分离培养及与支架材料的生物相容性研究硕士研究生：指导教师：指导小组：专业名称：李登军曲巍副教授张卫国教授外科学摘要周围神经缺损比较常见，临床上应用最广的解决方式是自体神经移植。自体神经移植是临床上治疗周围神经缺损的“金标准”，但自体神经移植存在着很大的缺陷，如供区感觉障碍、自体神经来源有限及遗留手术疤痕等问题，对于较长的或粗大的神经缺损，自体神经移植难以满足需

3、要。随着周围神经组织工程的兴起，自体神经来源不足的问题可望解决。目的：1．采用SD大鼠的雪旺细胞(SC)作为周围神经组织工程的种子细胞，在体外分离培养，探索体外培养及增殖雪旺细胞的方法。2．选取生长状况和纯度较好的第三代细胞，将经组织酶消化下来的细胞移植到单纯壳聚糖和复合FK506壳聚糖两种支架材料上，与第四代单纯细胞培养作为对照，观察雪旺细胞与支架材料的生物相容性。方法：1．取SD大鼠双侧的坐骨神经，预变性后，剪碎至1mm3大小的组织块，单酶消化法进行分离培养，Geneticin液抑制成纤维细胞生长，低浓度酶快速消化传代进一步纯化雪旺细胞，用光镜进行

4、形态学观察、S．100蛋白进行鉴定。2．取生长状况较好的第三代细胞，经组织酶消化下来的细胞移植到上述两种支架材料上，对照组继续传代培养以作对照，用MTT法(四甲基偶唑盐微量酶反应比色法)比较不同支架上细胞的生长活力，光镜观察细胞形态和S．100蛋白免疫鉴定细胞纯度。结果：1、通过上述方法分离培养获得了经S．100蛋白鉴定纯度为85％的第三代雪旺细胞，细胞数量为2．764×107／ml，细胞形态多数为梭形。2、雪旺细胞在复合FK506壳聚糖组纯度为93％，单纯壳聚糖组纯度为89％，第四代单纯培养组纯度为76％。3、单纯第四代雪旺细胞形态大部分呈梭形，少部

5、分为三角形，细胞活力一般，细胞OT值为0．1293，细胞排列不规则；单纯壳聚糖培养组梭形细胞比例更大，形态更规则，细胞活力较好，细胞OT值为0．1568，细胞排列呈现栅栏状；复合FK506壳聚糖组细胞形态最规则，细胞活力最好，细胞OT值为O．1805，细胞排列成典型的漩涡状或栅栏状。结论：l、SD大鼠坐骨神经中分离培养雪旺细胞来源确实，取材方便，可以作为周围神经组织工程试验研究的种子细胞来源，采用单酶消化法、Geneticin液抑制成纤维细胞生长，可以获得较高纯度的雪旺细胞。2、雪旺细胞与壳聚糖支架材料生物相容性好，FK506可促进细胞生长。关键词：雪

6、旺细胞组织工程细胞培养支架材料ExperimentalStudiesonCultureofSchwannCellsInVitroandBiocompatibilitybetweenSchwanncellsandBiomaterialsMaster：Deng—junLiTutor：ProWeiQuGuidinggroup：ProWei-guoZhangSpeciality：Surgery，OthopaedicsAbstraetAlthoughtherepairfollowinginjuryofperipheralnervehadachievedagrea

7、tprogressintherecentyearswiththedevelopmentofmicrosurgery，theresultsoftherepairwerestillnotsatisfied．Thepreferredapproachtorepairperipheralnervedefectwastobridgethetwoendsoftheinjuriednervewithasegmentofautologousnervegraftinclinic．Autologousnervegraftwasthegoldenstandardforthep

8、eripheralnervedefectrepair．Butthisapproachincur