运载ova+cd82bt细胞表位的兔出血症病毒样颗粒的表达与免疫原性分析

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1、ABSlRACTpositions2andl4ofVP60protein(N2)；3)deletedandreplacedaminoacidpositions196and207ofVP60protein(D1andI1)；and4)replacedaminoacidpositions217and228ofVP60protein(12)．FourchimericRHDV-VLPswerealsoanalyzedasvaccinevectorsinthetotalabsenceofadjuvant．Inte

2、restingly，RHDV-VLPs—OVAwereabletostimulatespecificIFNT-producingcellprimingandtogeneratepowerfulandspecificanti-VP60humoralimmunes．AllaboveresultshadlaidanimportanttheoreticalfoundationforthepossibilityofRHDVVLPsasmultivalentvaccinesvector，andtheseresult

3、swillbehelpfultoresearchtheRHDVVLPsdisplaysystem．KEYWORDS：Rabb#hemorrhagicdiseasevirus；capsidprotein；Tcellepitope；virus—likeparticles；chimericprotein；immunogenicityV缩略词表(Abbreviation)RHDVMHCVLPSPCRaabpSmL止AmpHAPBSkDaSf9ⅢACPEⅡN吖WbsternblotNCELISAELISPOTDI

4、gG缩略词表,(Abbreviation)RabbitHemorrhagicDiseaseVirus兔出血症病毒Majorhistocompatibilitycomplex主要组织相容性复合物virus．1ikeparticles病毒样粒子Polymerasechainreaction聚合酶链式反应Aminoacid氨基酸BasePair碱基对Second秒Milliliter毫升Microliter微升Ampicillin氨苄青霉素Hemagglutination血凝Phosphate—buffere

5、dsaline磷酸盐缓冲液kilo．dalton千道尔顿Spodoptera-frugiperda9昆虫草地夜蛾细胞Indirectimmunofluoresce间接免疫荧光cytopathiceffect细胞病变Interferon--f1，-干扰素Westernblot免疫转印Nitrocellulose硝化纤维Enzyme-linkedImmunosorbentAssay酶联免疫吸附试验Enzyme-linkedImmunospot(assay)酶联免疫斑点(实验)day天Immunoglobul

6、inG免疫球蛋白VII第一篇文献综述1兔出血症病毒RHDV的介绍1984年，兔出血症病毒首次在我国江苏无锡报道【l】。随后的20多年里，欧洲、亚州、澳大利亚和新西兰国家的养兔业受到这种高感染性和致病性病毒的侵袭【2—1，导致家兔和野兔因感染这种高感染性及高致病性的病毒大规模死亡，造成极大的经济损失。1989，世界卫生组织(OIE)将该病列为B类传染病，我国将其列为二类传染病。1．1兔出血症病毒RHDV的分类起初在RHDV的分类上，根据其基因组的核酸类型国际上存在两种不同观念，我国及美国科学家根据其核酸为

7、ssDNA等结果认为RHDV属于细小病毒或类细小病毒。但德国等欧洲国家学者根据基因组RNA序列分析，认为RHDV属于杯状病毒。我国学者吉传义等以南京(N1I)株和成都(CD)株人工感染家兔，取病死兔肝组织进行处理研究，发现不同毒株的RHDV既有RNA包装也有DNA包装，猜测国际上不同的分类观点可能与不同毒株的包装形式以及病毒样品处理的不同方法有关。在国际病毒分类委员会(ICTV)2000年的第七次报告中，将兔出血症病毒列入了新成立的杯状病毒科(Calicividdae)兔病毒属(Lagovirus)。1

8、．2RHDV的分子生物学研究进展1．2．1RHDV基因结构RHDV病毒粒子呈球形，无囊膜，直径32"--36nm，20面体对称【5。71。其基因组为单股正链RNA，基因组全长7437bp，分子量为2．4x106～2．6x106KD，5’末端无帽状结构，3’末端有一个短的polyA尾。RHDV基因组还有2个开放阅读框(ORF)[81。RHDV的ORFl基因序列为：NH2．P16-P23．2C解旋酶．P30．VPg．3C样蛋白．3D样蛋白．CO