茶藨子木层孔菌多糖及其硫酸化衍生物的制备、结构分析与生物活性研究

《茶藨子木层孔菌多糖及其硫酸化衍生物的制备、结构分析与生物活性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、山东大学博士学位论文茶藨子木层孔菌多糖及其硫酸化衍生物的制备、结构分析与生物活性研究姓名：刘玉红申请学位级别：博士专业：药物化学指导教师：王凤山20071010山东土学博士学位论文COSYConADMS0DEAEDSSEDTAGalGCG(、-MSGlcUAGlcHPGPCHSOClSVMan～rITNMRPRPSDS嗽符号说明(按英文字母顺序)ShiftCorrelationSpectroscopy刀豆蛋白A二甲基亚砜’二乙基氨基乙基2,2---qj基．2．硅-5-戊磺酸乙二胺四乙酸半乳糖气相色谱气相色谱．质谱连用葡糖醛酸葡萄糖高效凝胶渗透色谱HeteronuclearSingleQua

2、ntumCorrelation体节间血管甘露糖四甲基偶氮唑盐核磁共振茶蔗子木层孔菌多糖十二烷基硫酸钠三氟乙酸原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：杠日关于学位论文使用授权的声明本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印

3、或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：羡I丞i里导师签名山量土学博士学位论文茶藤子木层孔菌多糖及其硫酸化衍生物的制备、结构分析与生物活性研究研究生：刘玉红指导教师：王凤山教授摘要茶蔗子木层孔菌(Phellinusm啪为锈革孔菌科(Hymenochaetaceae)木层孔菌属(Phellinus)真菌，寄生于山楂、梨树的活体根茎上，民间用于防治肝炎、增强免疫力，疗效确切。木层孔菌属中很多真菌是药用资源，如松木层孔萄(Phellinuspi,u3、裂褐层孔菌(Phellinusrimosus)，作为中药桑黄来源的针层孔菌(Phellinusig,

4、,i口rius)、裂蹄针层孔菌(Phellinuslinteus)、鲍氏木层孔菌(Phellinusk删衲等。近年来研究发现，这些药用木层孔菌多糖具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖等作用，而关于茶蔗子木层孔菌的药效学物质基础成分的研究尚未见报道．我们首次从茶蔗子木层孔菌中分离得到一种具有免疫调节活性的多糖组分PRP，对其理化性质进行了分析，利用化学分析和波谱技术对其结构进行鉴定，结果表明PRP为一种结构新颖的葡聚糖。本论文还对PRP进行了硫酸化结构修饰，并对PRP及其硫酸化衍生物的体外抗肿瘤活性、免疫作用等生物活性进行了研究。研究内容与结果如下：(1)优化茶藤子木层孔菌总多糖(11Pl心)的提取

5、工艺．采用正交实验确定最佳提取工艺为15倍量水，90"C提取4h，共提取3次。酶法与Scvag法合用去蛋白，乙醇分级沉淀获得分级多糖(FPRP)，蒽酮．硫酸法测得多糖含量为87．08％，FoIin．酚法测得蛋白质含量为7．83％。(2)茶藤子木层孔菌多糖(PRP)的分离纯化．FPRP经DEAE-纤维素离子交换和Superdex凝胶过滤柱层析分离纯化得多糖纯品PRP。高效凝胶渗透色谱(Ⅲ．GPC)、醋酸纤维素薄膜电泳法鉴定表明PRP为均一多糖组分。HPGPC测得其重均分子质量(厨rw)为8．59kDa；PRP的比旋度蔓J+16．80(c0．1，H20)，比7山蠢土学博士学位论文旋度值较低提示

6、PRP可能含有较多的D．糖苷键；总糖含量为97．3％，蛋白质含量为1．03％．PRP与苯酚．硫酸及葸酮．萄《酸反应呈阳性，与咔唑．硫酸、茚三酮、碘．碘化钾及三氯化铁反应呈阴性．(3)PRP的结构分析．经水解、糖腈乙酸酯衍生化、薄层层析(TLO及气相色谱(Gc)分析表明，PRP仅由葡萄糖组成。高碘酸氧化结果表明PRP中含有1—6糖苷键，还应含有1--2或l一4糖苷键．Smith降解结果表明PRP中1--．6糖苷键(包括末端糖基)、l—弭糖苷键和l—+3糖苷键的摩尔比为5．o：3．o：1．o。PRP经甲基化、水解和乙酰化得到部分甲基化糖醇乙酸酯衍生物，气相色谱一质谱(GGMS)分析表明该衍生物

7、依次由1’5．二-m乙酰基-2，3’4’6-四-口甲基-葡萄糖(末端葡萄糖)、1,4,5．三．o．乙酰基．2,3。6-----O-qj基．葡萄糖(1—弭连接的葡萄糖)、1,5，6．三．m乙酰基．2'3，4．三．m甲基．葡萄糖(1—+6连接的葡萄糖)和1’3’5，6-四．O．乙酰基．2冉二．O．甲基．葡萄糖(1—3，6连接的葡萄糖)，组分摩尔比约为1．0：3．0：4．o．1．O．紫外(UV)结果表明PRP基本不含蛋白质和核