乳杆菌的有氧代谢与枯草芽孢杆菌益生作用机制分析

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1、533丑．wtblilisl68的自裂解534且subtilisl68自裂解液-1I血打索的验汪35L6planlarumLA】-kat突变株的构建36丑subtilisl68白裂解液激活^扫plantarumLAl过氧化氢酶37且subtilisl68自裂解液解除Lb．plantarumLAI所受氧胁迫38且．rubtilisl68自裂解液减少^^plantarumLAI的DNA损伤5．4讨论第六章乳杆菌与且subtilis混台喇微生态制剂I：艺创新初探61材料611菌株及载体612培养基613试剂⋯6．2方法．．⋯～⋯62lLb．caseiBL23一pLI57的电转化62

2、2乳杆菌与且subtilisl68的混合培养623混合培养物中各活翦数的测定"竹w”；。”他阳∞阳鲫帅∞鲫6．3结粜8063I￡^p／unl61nlmLAI、^ncoseiBL23静lI叶g养与摇动培养q：物量比较632混合培养接种条件的优化6．33混合培养物最佳收获时问点的确定6．4讨论参考文献致谢808l82848597：础’■醣蠢，§参习勰l拶、_’■r甲-1}活二．?成：⋯．j亭徘

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4、{鬻■■■-n—≥瓣二i’‘-j俏咛4删一j‘培1■目·’’l，?’、●噜■-■●登黜妒；1，。．r，工乳杆菌的有氧代谢与枯草芽孢杆菌益生作用机制研究摘要尽管乳酸苗的分类是基于它们厌氧

5、或者微好氧条件下代谢葡萄糖产生乳酸的能力，许多乳酸茁都可以在有氧条件r生K代谢并利用乳酸。乳酸卡『苗(Lactobacillus)属于典型的乳酸菌，由于其风味特性、益生特性、产生抗苗物质的能力及发酵过程中的易用性，常被刚于发酵食品、青贮饲料和益生菌制剂的生产中。乳酸杆菌在有氧条件下的生理代崩各不相同，如何充分利用有氧生长获敷高密度的荫休细胞并通过降低氧胁迫保持较高的细胞活性，对r其在实际生产中的应用具有重要的意义。枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)作为一种益生茵广泛应用f畜禽及水产养殖业，在动物口粮中添加丑subtilis可以明显增加胃肠道和粪便中乳杆菌的数量，

6、但其机理还没有得到充分解释。因此，本文以植物乳杆菌(Lbplamarum)，短小乳杆菌(Lbbrevts)为对象，对其有氧代谢进行了研究，同时以最mtblilis168为对象，基于乳杆菌的有氧代谢甜其益生作用机制进行探讨，另外还对乳杆菌与且subtilis混台型微生态制剂的』=艺创新进行了初步探索，具体结果如下：I．Lb．plantarHm的发群、有氧代谢与氧胁迫￡^plamarum是一种广泛应用十发酵食品，青贮饲料和盏J【{三茵制剂的菌株。本文研究TLb．plamarumLAI在MRSf05％萄萄糖)培养基中、以下四种条件下：①厌氧条件(静止培养)②有氧条件(摇动培养)③柯

7、氧呼吸条件(摇动培养+外源血红索和维生索K2，即将其电子传递链补充完整)④过氧化氢酶保护条件(摇动培养+外源血红素，即激活其自身过氧化氢酶)F的代谢特性，包括：①生物量(OD

8、6,oo)②细胞活力(CFU／mL)③葡萄糖代谢产物(乳酸、乙酸、乙醇)④氧胁迫(培养基中H202含量)。氧气参与￡6platItarumLAI的代谢时对其具有明显的两面性。有氧代谢可使其最高茼体密度从35提高毫50左右，但同时会产生高达3_4mM的H202，因此达到牛长峰值后细胞田严重的氧胁迫进逮Jf始死亡，2ad,时以后几乎不能检测到话山乐大学硕：卜荨位论文菌。^^plantarum发酵葡萄糖的终产

9、物主要是乳酸，而在有氧条件下转变为乳酸和大量乙酸的混合物，并且在添加血红索激活其自身过氧化氢酶后，高活力细胞可将乳酸完全转化为己酸，同时产生额外ATP而获得更高生物量。目前关于上6plantarum有氧呼吸的研究并不充分，本文的结果说明，有氧呼吸可以进步促进舱plantarum的有氧代谢．但对生物鼙的提高作用并不明显，与其它有氧条件并无显著差异。2．工^brevi，的发酵与有氧代谢研究Lhbrevis作为种莛要的发酵剂，常川J一切达f酪的生产，在_F酪的成熟-ls起着孵婪作朋．．小立研究J'LbbrevlsATCC367在上述凹种条件F的代谢特性。氧气参LjLbbrevl．’

10、的代谢时对其具有显著的盏处，既使其七物量从15提高至4I(摇动螯什)川警55(有氧呼吸)，又榆测刁；到H202的积累，罔此可保持较高的细胞活／J。Lbbrevis发酵葡萄糖的终产物主要是乳酸．同时件有C02和少缱己阱的生成，而在有毓条i"I-T转变为乳酸和大量乙艘的混合物，并最终将乳酸充仝转化为己酸，州时，小捌外ATP而获得璺高叶三物曼。￡髓bml,iY的有氧呼吸朱见报道．本文的结果说明，何氧呼吸町以显著促进￡^brevis的有氧代谢，使其比H他=·种条件下具有更迥述的代谢转化和更高的生物量。3．Lb．