六神丸抗血管生成的实验研究

《六神丸抗血管生成的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、山东中医药大学2005届硕士学位论文透明、浸蜡、包埋，每一组织块行4u讯连续切片3张，其中1张行HE染色，光镜下观察并拍照，各组结果如下(见图2一图6)：生理盐水组：肿瘤细胞呈片状分布且生长旺盛，并侵犯深层肌肉组织，与周围组织界限不清，细胞核染色深，核浆比增大，核固缩较少，瘤体周围有广泛水肿出血，大量白细胞浸润，瘤体中央可见组织坏死，此外瘤组织内新生微血管丰富。六神丸小剂量组：各组瘤细胞成团分布，瘤细胞体积大小不等，可见不同程度的片状坏死区及大量核碎裂，瘤细胞周围轻度水肿、出血，其中有少量白细胞浸润，并见瘤组织内及其周围新生的微血管。六神丸大剂量组：瘤组

2、织呈小片状生长，周围被侵及的肌肉组织变性萎缩，周围有少量出血，瘤组织内及其周围新生微血管减少。DDP组：瘤组织呈小片状生长，瘤细胞体积较小，形态较规则，多数胞核较小，呈圆形或卵圆形，染色较深，仍有部分胞核较大，形态不规则，瘤细胞周围出现水肿，瘤体中央可见片状坏死及少量炎细胞浸润，部分可见结缔组织包绕，瘤组织内微血管较少见。六神丸小剂量十DDP组：瘤组织呈小片状生长，瘤块内瘤细胞体积较小，形态差异较大，出现核固缩，周围有大量结缔组织包绕，瘤体边缘较整齐，周围组织少有侵袭，瘤组织内及其周围微血管明显减少或偶见。各用药组均表现出对S180移植瘤的抑制作用，六神

3、丸组均有抑制肿瘤血管生成的作用，六神丸大剂量组较六神丸小剂量组抑制效果更强，但不如DDP组，六神丸小剂量十DDP组抑瘤效果最好，抑制血管生成的作用也最强。表1六神丸水溶液对s180小鼠体内抑癌作用结果(ji±s)删学—丽』驰气旷一幕焉空白组1020．8764-0．81828．5464-0．704对照组1020．5404-1．07125．5844-2．0412．1764-0．362六神丸小剂量组1019．8684-1，02328，2144-1，029“1．8214-0．254“31．33六神丸大剂量组1020．2944-1，17925．7604-1．196

4、”1．4204-0．212。37．61DDP组1020．8914-0．99623．5434-1．130‘1．2954-0．231‘43．10蒯+裂冒量+lo2㈣47+1．0472Ⅲ28扭24l▲·1．0914-㈣07。52．07注：与空白组比AP<0．01与DDP组比}P<0．01六神九抗血管生成的实验研究生理盐水组六神丸小剂量组六神丸大剂量组DDP组六神丸小剂量+DDP组图f小鼠肿瘤图片山东中医药天学2005届硕士学位论文图2HE染色生理盐水组10×10图3HE染色六神丸小剂量组10×106一查塑苎垫竺重兰查塑墨墅!查——图4HE染色六神丸大剂量组10

5、×10图5HE染色DDP组IOXl07山东中匿药大学2005届硕士学位论文图6HE染色六神丸小剂量+DDP组10×108六神九抗血管生成的实验研究(三)实验二六神丸水溶液对荷瘤小鼠移植瘤MVD、bFGF表达的影响1．实验材料S180癌移植瘤标本2．免疫组化试剂(1)兔抗鼠CD34单克隆抗体一抗，商品号(0．2ml200119／m1)：BAl346，生产f-_{期：2004．11(2)即用型兔抗鼠b-FGF多克隆抗体，商品号(40T)：SA2036，生产日期：2004．11(3)印用型SABC免疫组化试剂盒(I／2KIT)：SAl022，生产同期：2004

6、．1l(4)DAB显色剂(20倍浓缩缓冲液)：ARl022以上试剂均购自博士德公司3．检测仪器HP：AS～1000高清晰度彩色病理图象分析系统(软件包购于武汉同济医科大学千屏影像工程公司)4．切片处理方法取出S180抑瘤肿瘤组织标本经10％福尔马林充分固定48小时，常规脱水、透明、浸蜡、包埋，每一组织块行4Itm连续切片3张，其中2张采用SABC法分剐行CD34、b-FGF免疫组化染色，参照试剂盒说明逐步操作。(1)组织经脱蜡至水化，蒸馏水冲3分钟；(2)3％H：0。，室温孵育20分钟，以封闭内源性过氧化物酶活性，蒸馏水洗3分钟×2次；(3)微波修复抗原

7、：将切片浸入枸橼酸盐缓冲液，PH6．0，微波炉加热至沸腾后断电，自然冷却：(4)滴加5％BSA封闭液，室温静置20分钟，甩去多余液体，不洗；(5)加八即用型兔抗鼠CD34或b-FGF单克隆抗体，置4℃冰箱过夜，PBS(Ptt7．27．6)洗2分钟X3次，阴性对照以PBS代替；(6)滴加生物素化山羊抗兔IgG，室温放置20分钟，PBS(PH7．2-7．6)洗2分钟×3次；(7)滴加试剂SABC，室温放置20分钟，PBS(PH7．2-7．6)洗5分钟×4次；(8)DAB显色：DAB显色试剂盒。取lm]蒸馏水，加试剂盒中A、B、C试剂各一山东中医药大擘2005

8、届硕士学住论丈滴，混匀后加至切片。室温显色，镜下控制反应时间，蒸馏水沈涤；(9)