四个str基因座荧光标记复合扩增的的研究及其法医学应用

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1、声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外。论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四JlI大学或其他教育机构的学位或证书面使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川大学读书期闯在导师指导下取得的，论文成果归四川大学所有，特此声明。申请人指导教师：划莉四川大学硕l：学位论文中文摘要四个STR基因座荧光标记复合扩增的研究及其法医学应用研究生刘莉导师李英碧教授四川大学华西基础医学与法医学院成都(610041)目的本课题

2、旨在建立已有群体遗传学数据的STR基因座DllS4951、D7S3062、GATAl68F06和D10S1426基因座的荧光标记复合扩增体系。按照美国DNA分析方法技术工作组(TheTechnologyWorkingGrouponDNAAnalysisMethods，TWGDAM)的指导方案进行法医学实用性研究。方法首先对多个本实验室做过群体遗传学研究的STR基因座进行筛选，从中获得四个多态性好、个人识别机率高，扩增产物长度片段有区别的四个STR基因座，即D1l$4951、D7S3062、GATAl65F06、D10S1426，利用传统的复合扩增方法，ABI．310毛细管电泳仪进行荧光标

3、记复合扩增的研究。并对复合扩增体系的灵敏度和准确度，不同扩增循环次数和热启动下复合扩增的效果等进行了研究。按照TWGDAM指导方案的基本要求，对该体系进行了法医学实用性研究，包括基因座的种属特异性，组织同一性及可重复性。结果成功建立了D11S4951、D7S3062、GATAl68F06和D10S1426的荧光标记复合扩增体系。而且，这一扩增体四川大学硕1．学位论文系条件易于优化。采用国产Taq酶，不需要热启动进行扩增，即可得到满意的扩增产物和分型结果。相对于国外昂贵的试剂盒，是一种成本低廉但效率高的STR基因座复合扩增体系。法医学应用性研究表明，该体系的检测灵敏度为0．25ng模板DN

4、A，四个STR基因座具有较高的种属特异性，对同一个体的不同组织检测结果一致，对常见基质上的检材及混合样本具有检测能力。对15个实际检案样本的检测证明，该体系能用于法医学个人识别和亲权鉴定。结论D11S4951、D7S3062、GATAl68F06和D10S1426的荧光标记复合扩增体系可应用ABI．310检测平台，获得可靠的分型结果。法医学应用性研究证明，该体系扩增条件易于优化、成本低廉、分型结果稳定，灵敏度和准确度高，种属特异性好，重复性好，对陈旧斑痕具有检测能力，能够对常见基质上的斑痕以及混合斑痕正确分型，与常见的动物及微生物无交叉反应，可以应用于法医学实际检案。【关键词】式反应(P

5、CR)群体遗传学法医学DNA分型短串联重复序列(STR)聚合酶链复合扩增荧光标记毛细管电泳荧光检测自动分析法四川I大学硕}学仲论文AbstractStudyofFourSTRLociFluorescentMultiplexPCRAmplificationSystemandItsApplicationinForensicGeneticsPestgraduate：LiLIUTutor：Prof．Y'm【gbiLIWestChinaCollegeofPreclinicalandForensicMedicine，SiehnanUniversi吼Chengdu610041，ER．Chinaobje

6、etiveThepurposeofthisprojectistoestablishthefluorescentMultiplexSTRsystemofD11$4951，D7S3062，GATAl68F06andD10S1426．AndvalidatetheforensicapplicationofthismultiplexsystemundertheguidelinesofTMGDAM．MethodsSelectD11$4951，D7S3062，GATAl68F06andD10S1426，withgoodpolymorphismsandhighDiscriminateProbabilit

7、yfromthelocithathavebeenundertakenthepopulationgeneticresearchbyourlaboratory．Andthenbegintheresearchofthisfluorescentmultiplexsystemusingthetraditionalmultiplexmethods．Usingdesignedprimerset，fourSTRlociDllS4951，D7S306