灵芝煎剂治疗急性鹅膏毒蕈中毒的临床及实验研究

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1、中南大学博士学位论文中文摘要摘要目的：本项研究根据中医药传统理论，在灵芝蕈治疗鹅膏毒蕈急性中毒取得初步I晦床疗效的基础上，通过系统的临床观察和动物实验，探讨灵芝煎剂治疗鹅膏毒蕈急性中毒的确切疗效、药理作用及其可能的解毒机理。方法：1．灵芝煎剂治疗急性鹅膏毒蕈中毒的临床研究：将103名毒蕈中毒患者按症状及中毒轻重分成轻、中、重三组，轻度中毒组32例、中度中毒组37例、重度中毒组34例。轻度中毒组每天用灵芝1009，加水煎制成1000ml液体，分4次口服；中度中毒组组每天用灵芝2009，加水煎成1500ml液，分6次口服；重度中

2、毒组每天用灵芝3009，加水煎制成2000ml液，分8次口服；三组疗程均为7天。观察指标t①临床抢救成功率；②肝功能等生化指标。即对中毒者血中总胆红素(S113)、非结合胆红素(UBS)、胆汁酸(BA)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)进行动态观察。2．建立鹅膏毒草急性中毒兔模型：采用鹅膏毒蕈子实体经加工制成4009／L的鹅膏毒蕈毒素粗提液，选取健康、8月龄、体重2Kg左右新西兰纯种白兔16只，随机分成对照组、实验I组、实验II组、实验ⅡI组，每组四只。对照组用10ml生理盐水灌胃，实验I～Ⅲ组分别按0．059／K

3、g、0．19／Kg、0．29／Kg剂量的鹅膏毒蕈毒素粗提液，I中南大学博士学位论文中文摘要加生理盐水配至10ml灌胃，均为一次性灌胃。观察动物中毒及存活情况，并于实验前、实验第3天、实验第5天，采取血标检查总胆红素(TBiL)、非结合胆红素(UBS)、胆汁酸(BA)、谷丙转氨酶(ALT)，于实验观测5天后处死实验动物，取肝脏作病理检查。3．灵芝煎剂干预鹅膏毒蕈急性中毒实验研究：采用鹅膏毒蕈子实体经加工制成4009／L的鹅膏毒蕈毒素粗提液动物造模，再用赤灵芝饮片粉碎煎煮过滤制成含生药100％和300％(即每lOOml含赤灵芝生

4、药lOOg和3009)的两种制剂干预治疗。选取健康新西兰白兔20只，随机分成对照组、毒模组、治疗组I、治疗组II4组，每组5只。对照组用生理盐水10ml灌胃，，其余3组均按100mg／Kg鹅膏毒蕈粗提液加生理盐水配至10ml灌胃一次，每日一次，疗程5天。治疗组I用100％的灵芝煎剂10ml灌胃，每日一次，疗程5天。治疗组II用300％的灵芝煎剂10ml灌胃，每日一次，疗程5天。观测指标：①动物存活情况；②分别于实验前、实验第3天、实验第5天，采取血标检查总胆红素(TBiL)、非结胆红素(UBS)、胆汁酸(BA)、谷丙转氨酶(

5、ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LD)、乳酸脱氢酶同功酶(Q-船DH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK加)；③肝细胞RNA多聚酶测定；④肝脏病理检查。结果：1．临床疗效：103例毒蕈中毒急诊病人全部救治成功，无一例死亡。病人相关生化指标的动态变化结果显示，入院后治疗过程中，Ⅱ中南大学博士学位论文中文摘要生化指标仅一过性升高，随着治疗的继续，其观测各项指标数值迅速下降，一般在7天左右恢复正常或接近正常。2．鹅膏毒蕈急性中毒兔模型：①动物存活情况显示：对照组及实验I组所有动物存活，实验II组在实验过程中死亡两

6、只，实验Ⅲ组在实验进行至3-5天中全部死亡。②中毒兔模型肝脏生化指标显示：对照组动物肝功能指标自始至终正常，实验组动物各项指标水平高低表明：肝功能损害程度与毒素剂量呈正变关系，而且随时间推移而损害程度加重，各组之间肝脏损害程度(以实验第3天ALT指标为例，对照组33．68±5．45，实验I组445．10___99．10，实验II组807．73±148．80，实验ⅡI组2288．27±353．72)差异有高度显著性(尺O．01)。③中毒兔模型肝脏病理改变，对照组病理显示肝小叶结构正常，肝细胞无坏死；实验中途死亡的动物肝细胞大片

7、死坏溶解，肝窦充血；而实验结束后被处死的动物肝细胞变性，小片状或点状死。结果显示造模成功，用浓度为400％的鹅膏毒蕈初毒素造模，以lOOmg％剂量为适宜。3．灵芝煎剂干预鹅膏毒蕈急性中毒实验研究结果：①动物存活情况显示：对照组、治疗I组、治疗II组无一只动物死亡，毒模组在实验过程中死亡两只；②肝脏生化指标显示：对照组动物肝功能指标自始至终正常，其余各组动物肝功能各项指标均损害明显，但治疗I、II组其观察指标迅速恢复正常，而毒模组则进行性升高，各组之间肝脏损害程度(以实验第3天ALT指标为例，对照组22．24±2．91，毒模组

8、179．88±49．19，治疗I组78．08±12．91，治疗II组47．98±Ⅲ中南大学博士学位论文中文摘要8．50，)差异有高度显著性(尺O．01)，心肌酶学指标变化情况与肝脏指标变化相同步。⑧灵芝煎剂与RNA多聚酶的活性关系：灵芝煎剂可以增加肝细胞RNA多聚酶的活性，而且灵芝的剂量(