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《SNT1199-2003-棉花中转基因成分定性PCR检测方法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1199-2003棉花中转基因成分定性PCR检测方法Protocolofthepolymerasechainreactionfordetectinggeneticallymodifiedcomponentsincotton2003-03-17发布2003-09-01实施中华人民共和国**国家质量监督检验检疫总局仇’IJSN/T1199-2003前言本标准的附录A为资料性附录.本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人:郑文杰、刘垣、唐丹舟、杨绍勇、何霖.本标准系首次发布的检验
2、检疫行业标准。SN/T1199-200棉花中转基因成分定性PCR检测方法1范围本标准规定了抗鳞翅目昆虫棉花中转基因成分的定性PCR检测方法。本标准适用于抗鳞翅目昆虫棉花SGK321,SGK9708,GKl,GK2,GK3,GK5,GK12,GK19,GK22,GK95-1(晋棉26号)、Bollgard(保铃棉)中转基因成分的定性PCR检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡注明日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本
3、适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法SN/T1193基因分析检测实验室技术要求SN/T1194植物及其产品转基因成分检测抽样和制样方法SN/T1204植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检验方法术语、定义和缩略语下列术语、定义和缩略语适用于本标准。3.1转签因transgene将物种本身不具有的、来源于其他物种的功能DNA序列，通过各种导人手段，使其在该物种中进行表达，以便该物种获得新的品种特征。3.2聚合酶链式反应polymerisechainreaction(PCR)模板基因序列先经高温变性成为单链，在DNA聚合酶作用和适宜的反应条件下，根据模板序列设计的两
4、条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而相互结合，接着在DNA聚合酶的作用下以四种脱氧核糖核酸(dNTP)为底物，使引物得以延伸，然后不断重复变性、退火和延伸这一循环，使欲扩增的基因片段以几何倍数扩增。3.3缩略语3.3.1PCR:polymerisechainreaction,聚合酶链式反应，简称PCR.3.3.2DNA:deoxyribonucleicacid，脱氧核糖核酸.3.3.3dNTP:deoxyribonucleosidetriphosphate，脱氧核昔三磷酸.3.3.4dATP:deoxyadenosinetriphosphate，脱氧腺昔三磷酸。3.3.5
5、dCTP:deoxycytidinetriphosphite，脱氧胞昔三磷酸。3.3.6dGTP:deoxyguanosinetriphosphate，脱氧鸟昔三磷酸.3.3.7dTTP;deoxythymidinetriphosphate，脱氧胸昔三磷酸。1SN/T1199-20033.3.8dUTP:deoxyuridinetriphosphate,脱氧尿营三磷酸.3.3.9by:basepair,碱基对.3.3.10EDTA.ethylenediaminetetraaceticacid，乙二胺四乙酸.3.3.11Taq.Thermusaquaticu，水生热栖菌。3.3.12Tris:t
6、ris(hydroxymethyl)aminomethane，三(羚甲基)氨基甲烷。3.3.13TE:Tris-CI,EDTA缓冲液.3.3.14CaMV35S:35Spromoterfromcauliflowermosaicvirus，花椰菜花叶病毒35S启动子.3.3.15NPTII:neomycin-3'-phosphotransferasegene，新霉素-3,-磷酸转移酶基因.3.3.16NOS:terminatorofnopalinesynthasegene,胭脂碱合成酶基因终止子。3.3.17CryIA(b)-CryIA(c),asyntheticgeneencodes608am
7、inoacids,insecticidal-activetruncatedproductidenticaltothatofcryIA(b)geneandcryIA(c)geneofBacillusthuringiensissubsp,Kursta-kisteainHD-1andHD-73苏云金芽抱杆菌杀虫毒蛋白。ryIA(b)和:ryIA(c)的合成基因.3.3.18CryIA(c):asynth
