多色荧光原位杂交技术的建立与其在食管癌分析中的应用

多色荧光原位杂交技术的建立与其在食管癌分析中的应用

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1、淀幕农攮必学礤士掌整论文前富食管鳞瘙氆鼬p妇辫鲑sq㈣醢sceilea端瓤。程鞲嚣SeC)麓簸常冤滟消讫臻绫辨瘤之一,葜煎亡攀蠢我国慧馁耱瘥魏亡妁繁靼位《L嗣瓣,2∞妨,遂爨上s盼s鼹食警滚淡建在中黧。上擞纪秘,Bovefi撼出遗传觳索舱敷变与瓣癯髯荚。蠹剡7玲筝代才发溅与黪瘩糖荚懿褥舅基因。麓在一鍪类鍪瓣日趣爨、漤范瘸_襁软缀织爽癣中,由于染惫搭媾嶷辍爨特征性,成必髓确诊断鞍分黧鼬搬标(Aw踽da醚Dt糍墩200l;Ku∞e瑙8艇D熊耩_黜她哦208l;秘粕勰鸡2∞l;瓢wi镊199鳓。最经典戆铡予燕骥瞧粒缨稳囊盘瘸(趟躐)悫者发擞染色体9号嗣22号爨饿。在怂氇中,9母染色

2、体上的c.8M慕困移懋22曝上b髅熬阂旁,彩液一令激食蒸嚣,表达~令N.溃亵b程缡璃,鬻e。瓣爨论l鏊邂缡码懿灏自震,舆有较嵩酌酪爨簸蛋自激酶活性(汤铡猷,1993)。同时,染色铬畸变后W熊产生肿癌绷魏特雾静黛耪犬分予(骚会蒸嚣鞠簸合溪爨),戳魏霹辍撵为耱瓣渗疗鹣後逸裁踩(嚣曲毯绺andsto漱,2∞3)。故染甑体畸变驰研究对于牌瘸发病枫瑷的阐明朔临床诊疗都疑肖薰耍澳意义。染色体畸变怒辩瘸发生发隧过程中髓鲎螫攀件(Alb鳓so靛et艇。,2∞3),染色镩畸变惫捂聚雹钵煞数嚣改变秘结秘跨变。絷惫簿缝穗穗交熬攀霭澎茂鸯鬓魏、扩瀵、餐整、缺失釉撬入等。染色体漪变可熊会遣成璃萋因激潘

3、和掷癌基因酌失活,献丽等教瀚癌麓发生茨袋。然禚,食警瘘凝色体髓交翦瓷辫缓少C越馘s溅e毫藤.,2e03;融娃鑫1.,i9懿;歉ct蘸。,20瓣;R蔚se晌l髓嘏一Voset蠛。,1993;Xiaoe{避,,199l;瓿net破。,2003),遐主蘩怒鞫舞蜜髂鼹癌缀织拣零蜷莽辫赡,难敷联餐离袋爨黪中麓分裂鞠,嚣藤燹法猿礁鉴定鸯之耀获熬、鬟杂鹣染惩体骧变。体终绩券豹食饕瘗绸熬祭篡誊较好静麓矮性,鬓予剿螯瞧离旗爨斡中磁染色髂,并裁缀大稷魔上反映黔癀鳃织申斡染包傣舅鬻变纯。爨~方鞭,缨熬系是黪潼硬究静蘩要实验耪糕之一,特澍是臻究瓣瘩发擞发震穗美基溺熬凌黥、蒺嚣努常在脖瘸发生靛熙中斡嚣

4、阕机制、胂瘸纂趿治疗的靶点及牌瘸药物臻选镣,都髓要剃耀镶蕤系露巍撰篓汹溅魏e£al。,200馥pei妇燃髓al。,2ee6;’%et越。,20灏)。戮魏,毳薛究绥魏纂中存谯的染憩体髓变嶷肖重甏的意义。髓卷疆学技零豹笈浸,稳疆臻瑷了荧光缀位杂交按零(Fl蝴ee黼e抽s妇Hybridization,FIsH)∞inke{戢烈.,1986)、多鬯荧光原搜焱交(M试娃co奴Fluor髂c张ee溉融l嚣y醅i壤z蠢菇黼,秘《疆S薹差)(sp巍耱r毹《。,19参◇、毙谱孩毯分褥S辨et斌豇螂蛩锄r魄(SKY)(sellr∞keta1.,1996)和蹴较基因组热交(comp勰&醢veg姐o

5、michyb矗dization,镬疆)(歉l嚣e蘧械et旗.,1992)等分子缨您遥蒋学技术。焚巍凝袋杂交建辑救elet艇,予j鳃6年钢遵的一种波瘸荧光法检测缨胞棱中或染穗体上特异DNA序列豹技术。零色焚巍暴鼗杂交虽露箕褰纛敝感瞧窝黪凳瞧,缳不憨麓瓣麓襄瓣瘸缓熬全都絷魏俸懿爱霞媾藏富况。M.FIsH等技术的出现使得在一次实验中进行肿瘸细胞全基因组染色体异常的筛瓷残爻霹戆。嚣戴,建立稳定熬多色荧毙黎霞杂交技本爨有{}豢耋要懿璞论意义及实骣纛用价值。然而,国内的24色M.FIsH的研究工作罕有报道,选今仅有两篇关于白血瘸缨瑰染惩搭分援靛文献(赵萌镣,20睨{李建勇等,2∞6)。遮

6、藏这一魂状熬爱要原戮是M,FISH的研究及应用目前藏要依赖于国外公司商博的多色探针池试剂盒及其杂交、检测识荣系统,楣关研究所需费鼷太高,曩翦浅难在黧凌接广疲题。本研究旨在建立一种多色荧光原位杂交技术,可将其应用予实体肿瘤的染色体畸变媳鉴定,为送一步硬究鼬瘪发生发展的分子枫捌提供~个良好鹃技术警套。6沈阳农煦大学撷士学位论文文献综述荧光原位杂交魑一种快速、有效的分子细胞遗传学技术,该技术可将特异核酸序列探针在中期梁色体上精确定位,也可以在间期核上测定圈的靶点。HsH技术弥补了传统显带技术的~些缺点,已经证明在检测染色体畸变或确定畸变染色体的断裂点方面有重要价值。然而,在实体肿瘤

7、中,鎏定隐藏染色体棼位或复杂的标记染色体仍然存在问题。多色荧光原位杂交(M.FIsH)技术的豳现解决了这些难题,例如能检测到传统显带方法不易发现翡噩显徽染畿体髓交(Schrocketa1.,j996;Schull筋etaj.,2∞2;St锄ouiieta1.,2∞4)。结合经典缨耱遗传学技术鞠分子遗传学技术,M,FIsH不仅能够签定隐藏易彼和复杂螅鬟搀,嚣爨霹娆分毫军鸯脖瘸发生捐关静重簧标记染色俸及其基因(Ferticta1.,2004:G瞄挂吼热etal,,200l;Kl凇i秘het畦.,20泓;Va

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