动物微生物学实验.doc

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1、动物微生物学实验 实验须知动物微生物学实验课的目的是:训练学生掌握微生物学最基本的操作技能;了解微生物学的基本知识;加深理解课堂讲授的某些微生物学理论。同时,通过实验,培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力;实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约、爱护公物的良好作风。为了上好微生物学实验课,并保证安全,特提出如下注意事项:1、每次实验前必须对实验内容进行充分预习,以了解实验的目的、原理和方法,做到心中有数,思路清楚。2、认真及时做好实验记录,对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验,则需记下每次观察的现象和结果,

2、以便分析。3、实验室内应保持整洁、勿高声谈话和随便走动,保持室内安静。4、实验时小心仔细,全部操作应严格按操作规程进行,万一遇有盛菌试管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时,应立即报告指导教师,及时处理,切勿隐瞒。5、实验过程中,切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。如遇火险,应先关掉火源,再用湿布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火机。6、使用显微镜或其他贵重仪器时,要求细心操作,特别爱护。对消耗材料和药品等要力求节约,用毕后仍放回原处。7、每次实验完毕后,必须把所用仪器抹净放妥,将实验室收拾整齐。擦净桌面

3、,如有菌液污染桌面或其他地方时,可用3%来苏尔液或5%石炭酸液覆盖其上半小时后擦去。如系芽孢杆菌,应适当延长消毒时间:凡带菌之工具(如吸管、玻璃刮捧等)在洗涤前须浸泡在3%来苏尔液中进行消毒:8、每次实验需进行培养的材科,应标明自己的组别及处理方法,放于教师指定的地点进行培养:实验室中的菌种和物品等,未经教师许可,不得携出室外:9、每次实验的结果,应以实事求是的科学态度填入报告表格中,力求简明准确,并连同思考题及时汇交教师批阅:10、离实验室前应将手洗净,注意关闭门窗、灯、火、煤气等。实验一显微镜的使用一、实验原理微生物

4、学研究用的显微镜通常有低倍物镜(16mm,10´)高倍物镜(4mm,40-45´)和油镜(1.8mm,95-100´)三种。油镜常标有黑圈或红圈,它是三者中放大倍数最大的。使用油镜时,油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间,不是隔一层空气,而是隔一层油质,称为油浸系。这种油常选用香柏油,因香柏油的折射率n=1.52,与玻璃基本相同。当光线通过载玻片后,可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。如果玻片与物镜之间的介质为空气,则称为干燥系;当光线通过玻片后,受到折射发生散射现象,进入物镜的光线显然减少,这样视野的照明度就减低

5、了利用油镜不但能增加照明度;更主要的是能增加数值口径。因为显微镜的放大效能由其数值孔径决定的。所谓数值孔径,即光线投射到物镜上的最大角度(称镜口角)的一半正弦,乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积,数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据;分辨力是指显微镜能辨别物体两点间最小距离的能力。一些物质的折射率:水1.33玻璃1.52空气1.0香柏油1.515。二、实验器材1、 仪器显微镜;2、 材料葡萄球菌、大肠杆菌、芽孢杆菌、炭疽杆菌等标本片,香柏油,二甲苯,擦镜纸。三、操作步骤1、取镜显微镜是光学精密仪器,使用时应

6、特别小心。从镜箱中取出时,一手握镜臂,一手托镜座,放在实验台上。在使用时要特别小心。使用前首先要熟悉显微镜的结构和性能,检查各部零件是否完全合用,镜身有无尘土,镜头是否清洁。做好必要的清洁和调整工作。2、调节光源1)将低倍物镜旋到镜筒下方,旋转粗调螺旋,使镜头和载物台距离约为0.5厘米左右。2)上升聚光器,使之与载物台表面相距1毫米左右。3)左眼看目镜调节反光镜镜面角度(在天然的光线下观察,一般用平面反光镜;若以灯光为光源,则一般多用凹面反光镜)。开闭光圈,调节光线强弱,直至视野内得到最均匀最适宜的照明为止。一般染色标本

7、油镜检查对,光度宜强,可将光圈开大,聚光器上升到最高,反光镜调至最强;未染色标本,在低倍镜或高倍镜观察时,应适当地缩小光圈,下降聚光器,调节反光镜,使光度减弱,否则光线过强不易观察。3、低倍镜观察低倍物镜(8´或10´)视野面广,焦点深度较深,为易于发现目标确定检查位置,故应先用低倍镜观察为宜。操作步骤:1)先将标本玻片置于载物台上(注意标本朝上),并将标本部位处于物镜的正下方、转动粗调螺旋,上升载物台使物镜至距标本约0.5厘米处。2)左眼看目镜,同时反时针方向慢慢旋转粗调节螺旋使载物台缓慢上升,至视野内出现物象后,改用

8、细调节螺旋,上下微微转动,仔细调节焦距和照明,直至视野内获得清晰的物象,及时确定需进一步观察的部位。3)移动推动器。将所要观察的部位置于视野中心,准备换高倍镜观察。4、高倍镜观察将高倍物镜(40´)转至镜筒下方(在转换物镜时,要从侧面注视。以防低倍镜未对好焦距而造成镜头与玻片相撞),调节光圈和聚光镜,使光线亮度适中,

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