wnt通路抑制剂wnt-c59对病理性心肌肥大治疗作用的分析

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1、万方数据第三军医大学硕士学位论文Wnt．C59是Wnt蛋白活化的抑制剂，可从起始阻断Wm通路，进而使经典通路和非经典通路同时失活。在肿瘤治疗实验中，Wnt．C59可以对46种肿瘤细胞的增殖产生不显著的抑制作用，且可降低转染MMTV-WNTl裸鼠的乳腺癌发生率瞵j⋯。在本研究中，我们应用主动脉缩窄诱导心脏病理性肥大以及Ang．II诱导心肌细胞肥大两个模型，通过对心肌肥大程度、心功能改变、相关信号分子的激活等指标检测Wnt．C59对心肌肥大的治疗作用。为Wnt．C59应用于临床治疗提供理论依据。7万方数据第三军医

2、大学硕士学位论文第二章Wnt—C59对TAC诱导小鼠心肌肥大及Ang—II诱导心肌细胞肥大的作用病理性心肌肥大是高血压、心肌病以及冠状动脉粥样硬化性心脏病等多种心血管疾病的一个重要病理改变。病变初期，心肌细胞的肌纤维增多、变长来增加心肌收缩力，代偿病理因素所致心输出量的减少。但心肌细胞的代偿能力有限，当致病因素长期存在，病变持续加重，心肌细胞不堪重负将失去代偿能力而发生凋亡。凋亡的心肌细胞逐渐由成纤维细胞取代、心室壁由厚变薄、心肌收缩能力下降、心功能严重受损、最后可导致严重的心律失常和心力衰竭【9J。有研究表

3、明Wnt通路的多个信号分子与心肌肥大的关系密切，阻断经典和(或)非经典通路都可以产生减轻病理性心肌肥大效应【l⋯。但使用Wnt通路抑制剂来对其进行干预进而阻止心肌肥大的发展的研究目前国内外尚无报道。以往存在的Wnt通路抑制剂如sFRPs、DDKs等，大都阻断单一通路。鉴于心肌肥大是由多条Wnt通路参与这一特点，非选择性地抑制Wnt通路对治疗心肌肥大的效果可能优于常用的WNT经典通路阻滞剂。Wnt．C59通过抑制Wnt配体蛋白的合成，非选择性地抑制Wnt经典和非经典通路。为了研究Wnt．C59对病理性心肌肥大的

4、治疗效果，本实验采取主动脉缩窄术(TAC)诱导C57／BL6J小鼠病理性心肌肥大的动物模型结合Ang．II刺激大鼠乳鼠心肌细胞模型，使用Wnt．C59对两个模型进行干预，后观察心功能、心脏质量指数(心脏质量／体重)、心肌细胞横截面积(CSA)、NRVM表面积面、心肌纤维化程度以及心肌细胞凋亡等情况来评估治疗效果。2．1材料与方法2．1．1主要动物C57／BL6J小鼠SD大鼠乳鼠2．1．2主要仪器显微胸骨剪显微组织剪显微组织镊小动物胸骨撑开器普通组织剪北京实验动物中心第三军医大学大坪医院实验动物中心德国Fine

5、ScienceTools公司美国M撕。公司美国Mario公司德国FineScienceTools公司唐山恒昌医疗器械有限公司8万方数据第三军医大学硕士学位论文眼科镊止血钳无菌注射器小动物呼吸机小动物吸入麻醉机手术显微镜动物用彩色超声仪细胞培养板细胞培养皿层流超净工作台二氧化碳细胞培养箱医用控温水浴箱微量电子天平．80℃低温冰箱．20℃低温冰箱制冰机无菌细胞过滤器200目细胞过滤网高温高压灭菌器Eppendorf管实验用高温烤箱微量加样枪低温离心机光学显微镜荧光显微镜陶瓷研钵核酸浓度分析仪荧光定量PCR仪Wes

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