NY334-1998-增产菌粉剂.pdf

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1、NY334一1998前言本标准由农业部科学技术与质量标准司提出并归口。本标准起草单位:中国农业大学。本标准主要起草人:梅汝鸿、徐维敏、蒋慧敏。中华人民共和国农业行业标准NY334一，998增产菌粉剂Yield-increasingbacteriapowder1范围本标准规定了增产菌芽抱杆菌(Bacillussp)产品的质量指标、检验方法、检验规则和包装、标志、运输、贮存要求以及有效期。本标准适用于以芽抱杆菌为菌种的增产菌粉剂。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的

2、各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性HG/T3309-1983农药粉剂细度测定方法(原HG/T2-896-83)3总则增产菌属芽抱杆菌是依据植物微生态学原理研制出的一种微生态制剂。增产菌粉剂选用内生共生芽抱杆菌为菌种，经过工业化生产的粉剂剂型，通过拌种和喷雾，能在植物体内定殖、繁殖、转移，起调控植物个体微生态作用，具有提高产量、改善品质和增强抗性的效果。4技术要求4.1外观:灰白色或带色泽粉末。4.2增产菌粉剂应符合表1的要求。表1名称指标含菌量，亿个/9300士30李悬浮度，%细度(通过0.09mm孔径筛)，%18050簇水分，%蕊杂菌量，%5检验方法51

3、含菌量的测定51.飞试剂牛肉膏，生化试剂。蛋白陈，生化试剂。琼脂，生化试剂。无菌水。中华人民共和国农业部1998一06一11批准1999一01一01实施NY334一19985门.2仪器超净工作台培养皿，直径9cm,锥形瓶,250mL,量筒,100ML,吸管，2mL灭菌锅，。.25m',电炉，1000W,培养箱，20-45'C。振荡器5门.3培养基的配制称取牛肉膏0.9g,蛋白陈3g，琼脂6g，加热溶解在300mL水中，以0.1mol/L氢氧化钠(NaOH)或盐酸(HCI)调pH值至7.0-7.5之间，分装在12个三角瓶中，然后用灭菌锅在。.11MPa压力下灭菌

4、30min备用。5门.4操作步骤5.1.4.1在12个三角瓶中各加入10^-20个玻璃球，加棉塞，包牛皮纸封口，与培养皿、吸管(用防湿纸包好)一并放入灭菌锅内，在0.11MPa压力下灭菌30mine5门4.2将灭好菌的三角瓶取出，分成三组，每组四个，每个三角瓶中加无菌水99mL，并编写号码。在每组第一个三角形瓶内各加人1g样品(准确至。.1g)后，于振荡器上振荡20min,5.1.4.3将上述处理后稀释液分别准确吸取1mL，注入每组的第二个三角瓶中，再用振荡器振荡20min，直到每组的第四个三角瓶振荡完为止(此时1g菌剂稀释成10X10、个/mL，即已稀释为1

5、亿倍)。5.14.4在超净台或灭菌室内，准确吸取1mL上述稀释液，注人灭菌的培养皿中，然后迅速倒人30mL约45℃的培养基，制成平板。于30^-35℃培养箱中培养24h后，用肉眼数其长出的菌落数，培养皿中的菌落数即每克样品的含菌数(亿个/g)。须同时做三个平行试验(即三个重复)，取菌落数在20-200个的一组计数，平行测定结果之差，不得超过20个菌落数，计算平均值，经显著性测定，达显著者即为测定结果。5.2悬浮率的测定5.2.1仪器血球计数板。光学显微镜。吸管，5mL,2m1。振荡器。5.2.2检验程序操作步骤5.2.2.1称取样品1g(准确至。.1g)装入盛

6、有99mL无菌水的三角瓶中，然后用振荡器振荡1min,5.2.2.2用吸管从三角瓶中吸取菌液1mL，注人盛有9mL水的试管中，摇匀待用。此步骤重复至显微镜下能计数的浓度为止。5.2.2.3用吸管吸取可以计数试管内的少许菌液，从盖玻片的一端注人25X16的血球计数板，使菌液沿玻片间隙渗人，并用滤纸吸干槽中溢出的多余菌液。在操作过程中应注意不要使计数板与玻片间产生气泡，否则重作。制好玻片后，待查。5.2-2.4检验计数将制好的玻片放在光学显微镜下，放大400倍，数四个角上的四个大格和中间的一个大格(共16X5=8。个小格)中的芽抱杆菌个数。其含菌量n，(亿个/9)

7、按式(1)计算:NY334一1998，、一D}(x4x10,··一，。，····，·。。，(1)巧V式中:C—稀释倍数;D-80个小格的芽抱菌总数;4xlos—血球计数板每小格容积换算成1mL容积的常数5-2.2,5将5.2.2.1的菌液沉淀30min后取上部的清液，按5.2.2.2和5.2.2.3测定芽抱杆菌数二:，悬浮度X,(oo)按式(2)计算:X,(环)二业X100左1式中:。飞—菌液振荡1mi。的含菌量，亿个/9;rzz—菌液沉淀30min的含菌量，亿个组。53细度的测定按HG/T3309-1983中湿筛法测定。5.4水分的测定5.4-1仪器电热烘箱

8、:80-150'C.分析天平:精确"T