共振光散射技术在蛋白质及药物的分析中应用的研究

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1、西南大学硕士毕、lk论文摘要共振光散射技术在蛋白质及药物分析中的应用研究分析化学专业硕士研究生陈彪指导教师黄承志教授摘要近年来，共振光散射(RLs)法作为一种新的光学分析技术，方法简单，灵敏度高。可以用普通的荧光分光光度计测量，因此，该方法得到了广泛的应用。例如，共振光散射技术被用于表征有机染料的聚集，有机染料和金属配合物在生物大分子模板上的堆积，以及药物分子与生物大分子的相互作用等，广泛用于无机离子，蛋白质、核酸和药物的测定中。RLS技术已成为超分子化学、物理化学和分析化学领域中强有力的分析技术。研究了阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)

2、，阳离子染料罗丹明B，与蛋白质相互作用的共振光散射(RLS)光谱及用于蛋白质的测定。实验表明，在pH4．35的酸性介质中，SDS的共振光散射强度较小，它与蛋白质结合后，共振光散射强度能得到增强，但加入阳离子染料罗丹明B后，共振光散射强度显著增强。在波长332．0nnl处，A／RLs最丈，并且增强的共振光散射信号与蛋白质的浓度成正比。据此建立了一种测定蛋白质的新方法，该方法简单，快速，灵敏度高，对HSA的检测限达到1．9ng／mL，线性范围为0．Ol～5．0gg／mL。用于人血清样品中蛋白质的测定，回收率为94．O％～105．5％。研究了阴离子表

3、面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)．三种醌距胺类染料天青A，天青B，亚甲基蓝，与蛋白质相互作用的共振光散射(RLS)光谱及用于蛋白质的测定。实验表明，在pH4．10的条件下，SDS的共振光散射强度较小，它与蛋白质结合后，共振光散射强度能得到增强，但加入一种阳离子染料后，共振光散射强度显著增强，并且增强的共振光散射信号与蛋白质的浓度成正比。由HSA．SDS与这三种阳离子染料研究的结果可以推出一般结论，当pH值在HSA(p／o=4．7-4．9)的等电点之下时，HSA带正电荷，它与阴离子表面活性剂SDS结合后，再与西南大学硕十毕业论文摘要阳离子染料作用

4、，可以产生增强的共振光散射光谱。据此建立了一种测定蛋白质的新方法，该方法简单，快速，灵敏度高。用于人血清样品中蛋白质的测定，回收率为93．0％,一104．O％。巴比妥类药物分子结构中含有丙二酰脲或者酰亚胺基团，在碱性条件下，巴比妥钠与铜的吡啶配合物作用，在350．0-500．0am范围内产生共振光散射(RLS)增强信号。在最佳反应条件下，增强的共振光散射强度(ⅣRLs)与巴比妥钠的浓度呈线性关系。据此，建立了共振光散射测量巴比妥钠药物的新方法。方法的检测限为4．3烬皿，用于合成样的测定，回收率在95．70／一103．5％之间。关键词：共振光散射

5、蛋白质阳离子染料阴离子表面活性剂两南大学硕+毕业论文AbstractApplicationsofResonanceLightScatteringTechniqueinProteinandPharmaceuticalAnalysisMajor：AnalyticalChemistryMasterCandidate：BiaoChenSupervisor：Prof．ChengzhiHuangABSTRACTRecently,resonancelightscattering(RLS)techniquehasbeenextensivelyandsucces

6、sfullyutilizedinvariousfieldsbecauseofitssimplemanipulation,highsensitivityandconvenientexperimentalconditions．Forexample，RLStechniquphasbeenappliedtothecharacterizationofsupermolecularassemblies，theresearchofinteractionofdyeandbiomacromoleculesuchasprotein,nucleicacid．RLSte

7、chniquehasbecomeapowerfulandroutineassaymethodinanalyticalchemistryarea．Anewresonancelightscatteringmethodforthedetea'minationoftraceproteinswasdeveloped．TheinteractionofliSAwithSDSandrhodamineBischaracterizedbytheenhancedRLSspectra．AtpH4．35，theRLSintensitiesofSDSareweak,and

8、itincreaseswhenaddedprotein,theRLSintensitiesincreasegreatlywhenaddedrhodam