共振光散射技术在药物分析中的应用论文

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1、共振光散射技术在药物分析中的应用论文【摘要】对共振光散射技术在药物与生物大分子分析测定中的应用状况及其进展进行了综述。重点介绍了该方法在生物体液中药物的分析和中药成分的分析应用前景。为体内大分子药物及其他药物成分的检测方法研究提供了新途径。【关键词】共振光散射技术;药物分析Abstract:Theapplicationandthedevelopmentoftheresonancelightscattering(RLS)methodusedindrugdeterminationandthebiomacromoleculedeterminationaceuti

2、calquantificationinbiologicalfluids,andtheapplicationofRLSinquantificationofChinesemedicineethodmightbeanovelinationmacromoleculardrugsandothermedicinalingredientsinvivo.Keyaceuticalquantification共振光散射(resonancelightscattering，RLS)是利用普通荧光分光光度法对散射光进行测量的一种散射光分析技术1。该技术由于其简单、快速、灵敏的分析特

3、点，吸引了生命科学、分析化学、环境科学、材料科学等领域的分析工作者对其理论和应用进行了深入的研究，促进了分析学科内部各个分支之间的联系，尤其是在生化领域已经取得一定的研究成果2。光散射现象广泛存在于光与粒子相互作用的过程中，当介质中粒子的直径(d)与入射光波长(λ0)存在d≤0.05λ0时，产生的是以瑞利(Rayleigh)散射为主的分子散射光3。根据RLS理论可以得到散射光强度与散射粒子的浓度c成正比的关系，即IRLS=Kcb。据此可以用于大分子物质溶液的分析测定1。RLS分析法灵敏度高.freeloeersolGreen法9与Bormophenolbl

4、ue法10等。Pasetmack1将RLS技术用于测定微量蛋白质以来，RLS法分析技术以其方法简单、快速、灵敏度高，在生物大分子分析测定研究中的报道日益增多，灵敏度可达纳克级11。黄承志等研究了阴离子表面活性剂罗丹明B(RhodamineB，RhB)与十二烷基硫酸钠(SDS)蛋白质体系的RLS光谱特征。实验发现，SDS与HSA(humanserumalbumin，HSA)结合后再与RhB作用，其散射光强度增强。且RLS增强的程度与蛋白的浓度在一定范围内呈线性关系。据此，建立了一种测定人血清中总蛋白质的新方法12。胡之德等基于在pH2.11的酸性溶液中，聚

5、乙二醇辛基苯基醚(OP)对亮丽春红5R蛋白质体系的RLS信号有强烈的增敏现象，建立了OP蛋白质亮丽春红5R三元体系测定人血清中蛋白质浓度的新方法。该体系对人血清白蛋白检测的线性范围在0.0～10.0pg·mL-1之间，检测限为5.0ng·mL-1，检测实际样品的回收率在97.80%～109.62%之间，方法令人满意13。王锡宁等利用RLS技术测定白蛋白、红蛋白。研究了间苯二酚黄OP蛋白质体系RLS光谱特性，确定了在340.0nm处，pH2.40，间苯二酚黄浓度为2.3×10-5mol·L-1，OP的浓度为3.0×10-5mol·L-1时为最佳反应

6、条件，据此建立了一种灵敏度高的测定蛋白质的新方法14。薛蓓等研究了流动注射(FIA)RLS技术联用在线测定人血清中蛋白质含量。以SDS为荧光探针，利用未曾报道过的RLS与FIA联用检测人血清样品中蛋白质含量。与单纯用RLS法测定比较，分析时间由40min缩短至1min，RLS信号的重现性得到了显著改善，提高了实验的灵敏度和重现性15。梁宏等在普通荧光分光光度计上选择合适的激发光和发射光通带宽度，利用RLS技术，研究了生理pH值(7.43±0.02)，25℃下，金(Ⅲ)与血清白蛋白的相互作用。首次观测到金(Ⅲ)对血清白蛋白的RLS强度随着金(Ⅲ)浓度增加而

7、降低。结果表明，金(Ⅲ)与血清白蛋白的结合会破坏血清白蛋白分子聚集，使血清白蛋白中的二硫桥键断裂，导致白蛋白分子趋于松散，散射截面积减小，表现为RLS强度降低16。1.2核酸核酸是遗传信息的载体和基因表达的物质基础，在生物的生长、发育等活动中具有十分重要的作用。目前核酸分析测定的方法主要有分光光度法、荧光光度法、化学发光法、探针技术法、免疫分析法等，其中分光光度法17和荧光光度法18使用较多。紫外分光光度法操作简单，但由于灵敏度低，测定的干扰因素多，使其在应用上受到了限制;荧光分析法具有选择性好和灵敏度高，但荧光试剂价格昂贵，而且部分荧光试剂有致癌活性。针

8、对上述情况，RLS法因操作简便快速，灵敏度高，试剂无毒性等优势，在