大鼠骨髓基质干细胞在纳米复合支架上成骨向分化的研究

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1、四川大擘华西口腔医学院硕士学位论文缩略词英文全称BMSCsn．HA胜rBMSCs碰eoCNn-HA，PA66SEM缩略词表bonemalTOWmesenchymalstemcells／bonemarrowslxomaleelIsnKno—hydroxyapatite／polyamidratbonemalTOWsromalcelIsalkalinephosphataseosteocalcinnano-hydroxyapatitc／polyamid66Scanningelectronmicroscope中文名称骨髓问充质干细胞／骨髓

2、基质细胞纳米羟磷灰石，聚酰胺大鼠骨髓基质细胞碱性磷酸酶骨钙素纳米羟磷灰石／聚酰胺66扫描电子显微镜四川大学华西口腔医学院硕士学住论文声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的，论文成果归酬嫦脯浦舻吼申请卉罔指导竺

3、乡堵垆学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解四川大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权四川大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。学位论文作者签名：堋导壁篓篓；；抄签字日期：07年5月9日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：签字日期：07年5月9日联系方式：邮政编码：四川大学华西口腔医学院硕士擘住论文大鼠骨髓基质干细胞在纳米复合支架上的成骨向分化研究硕士研究生：方园导

4、师：王少安中文摘要目的：本课题旨在研究纳米羟基磷灰石／聚酰胺66三维复合支架材料对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和成骨向分化的影响，了解其作为骨组织工程支架的优势和局限性，为其制备改进和临床应用提供理论支持．方法；原代分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，接种子该支架上。构建简易灌注式生物反应器，以平面静态培养为对照，在三维静态和三维动态灌注两种条件下矿化诱导培养细胞．支架复合体，在不同时点进行扫描电镜观察和MTT、碱性磷酸酶活性、钙素水平的定量测定。结果：静态组和动态组的MTT曲线均保持稳定缓慢上升而对照组在第9天以后呈下降趋势；三组的碱性

5、磷酸酶活性均在第7天达到峰值，动静两组区别不明显；动态组在14、21天骨钙素表达显著高于静态组，静态组在7、14、21天骨钙素水平又高于对照。扫描电镜下，有别于静态培养中覆盖多孔表面的细胞毯，动态培养表现出空间板层状的立体结构。结论：与二维平面培养相比，纳米羟基磷灰石／聚酰胺66三维复合支架材料能在第9天与21天之间保持和促进rBMSCs的增殖活力，使其具有更高的成骨向分化趋势和骨基质成分表达。与静态培养相比，动态灌流并不能提高细胞在材料上的早期成骨向分化，却能提高rBMSCs成骨向分化的晚期在该材料上的成骨功能表达。2四川大学

6、华西口腔医擘院硕士学位论文综上所述，纳米羟基磷灰石／聚酰胺66三维复合支架具有较好的生物相容性和骨引导性，有较好的应用前景，但还必须在通透性等方面做出改进。关键词：骨髓间充质干细胞；纳米羟基磷灰石；支架；动态细胞培养；生物反应器：组织工程四川大学华西口腔医学院硕士擘位论文Osteogenicdifferentiationofratbonemarrowmesenchymalstemcellsculturedonnano-hydroxyapatite／polyamide66scaffoldinvitroPos蟾raduate：Fan

7、gyuanTutor：WangShaoanAbstractObjeetive：Toinvestigatetheeffectsofthethreedimensionalcompositescaffoldnano-hydroxyapatite／polyamide66(n-HA／PA66)structureOiltheproliferationandosteogenicdifferentiationoftheratbonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)．aswellasitsascendancyan

8、dlimitationsemployedasbonetissueengineeringscaffold,SOastoprovidtheoreticalsupportforfurtherrefiningandclinicalapplications．Methods