不同频率振动刺激骨髓基质干细胞成骨分化在体实验研究

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1、不同频率振动刺激骨髓基质干细胞成骨分化在体实验研究计：学位论文：35页表格：4个插图：25幅聂升波指导教师：赵文志教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：外科学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独锚性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究

2、所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：燃签字日期：逝年上月上日不同频率振动刺激骨髓基质干细胞成骨分化在体实验研究硕士生姓名：聂升波指导老师：赵文志教授指导小组：何盛为教授专业名称：外科学摘要目的：探讨不同频率的低频振动对活体内骨缺损微环境中的骨髓基质干细胞(Bonemarrowstromalcells，BMSCs)成骨分化的影响，并进一步确定BMSCs定向分化为成骨细胞(Osteoblast)的最佳振动频率。方法：选取40只新西兰兔，分别于其左肱骨干骺端建立4*4mm的骨缺损模型，并植入BMSCs与脱钙骨复合体，随机分为5

3、组：A组0Hz、B组12．5Hz、C组25Hz、D组50Hz、E组lOOHz频率，每组均施加加速度为0．3g的正弦振动波刺激，每天振动30分钟，连续4周，4N后，处死动物，取肱骨标本进行大体观察、电镜切片观察、碱性磷酸酶染色分析、RT．PCR法检测I型胶原蛋白(Pre．Colla)。运用SPSSl3．0软件进行统计学分析。结果：大体观察：A组中骨缺损处软组织粘连，血肿机化，并逐渐演变为质地较软的肉芽组织，无明显骨痂形成；B、C、D、E组中骨缺损处的血肿已经完全机化，肉芽组织中已经开始软骨化骨过程，骨缺损空腔壁处可见有薄层骨痂生成，形状不规则，颜色灰暗，按

4、压有阻抗，与空腔壁骨质衔接紧密不易分离，其中C组、D组骨缺损处骨痂均匀填塞于整个空腔，表面塑形良好，高度与周壁相平，颜色灰白，按压质硬。电镜下观察：A组骨缺损处无骨痂生成，纤维组织填充于骨缺损处，纤维组织与周围组织衔接不紧密；而B组、C组、D组、E组骨缺损处可见大量骨细胞且基质少，有骨性骨痂生成，骨痂填塞均匀，纤维组织与周围骨壁衔接紧密。C组、D组骨质结构组织学愈合等级普遍较高，骨痂中骨细胞排列致密形成骨小梁组织，且与周围骨壁形成骨性结合。碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，ALP)染色：各组均显示不同程度的阳性染色，A组样品中骨细胞染色

5、后的阳性信号计数少，且骨细胞阳性显色浅，B组、C组、D组、E组中的阳性信号较多，骨细胞阳性显色较深，A组碱性磷酸酶染色后，骨小梁中可见纤维组织张入，较多的软骨基团出现，但是未见有骨组织生成。B组、C组、D组、E组中则在骨小梁间隙可见纤维组织张入，较多的软骨基团出现，可见大量的Osteoblast，骨缺损与断端形成良好的骨性连接，塑形良好。I型胶原蛋白(Pre．Colla)的相对表达情况：A组中I型胶原蛋I刍(Pre．Colla)表达明显低于B组、C组、D组、E组。另外C组、D组I型胶原蛋l刍(Pre—Colla)表达量相对高于D组、E组。结论：实验结果显

6、示不同频率的低频振动均能够刺激体内微环境中BMSCs的成骨分化；其中以25Hz、50Hz频率的低频振动的效果最明显。关键词：低频振动骨髓基质干细胞体内微环境成骨分化2DifferentvibrationfrequencystimulationmatrixbonemarrowstromalcellsinthebodyexperimentresearchdifferentiationMasterdegreecandidate：NieShengboSupervisor：ProfessorZhaoWenzhiVice．supervisor：ProfessorHe

7、ShengweiMajor：surgeryAbstractObjectire：ToinvestigatetheeffectofthedifferentlowvibrationfrequencYonOste。gellicdifferentiafi。n。finViV。Bonemarrowstromalcellsintllemicroenviro肿entoft11evivoBonedefect，andtoquallti母theoptimallowvibrationfrequencytMethods：Selectonly40NewZealandrabbits，T

8、heleftkeydifferencein印proachtoestablisht