家兔肠缺血再灌注损伤

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1、家兔肠缺血/再灌注损伤Ischemia-ReperfusionInjuryinRabbit(I/R)中南大学病理生理学教研室【定义】缺血的组织、器官经恢复血液灌注后不但不能使结构和功能恢复，反而加重其功能障碍和结构损伤的现象称为缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusionInjury，I/R)【区别】缺血-再灌注与缺血-再灌注损伤缺血损伤与缺血再灌注损伤【影响缺血再灌注损伤发生的因素】缺血时间缺血程度组织缺血前的状态：侧支循环对氧需求组织缺血前的机能状态再灌注条件：压力、温度、pH值、再灌液成分等掌握缺血再灌注损伤模型的复制，比较缺血损伤和缺血再灌注损伤的区别

2、观察缺血再灌注损伤的表现，理解缺血再灌注损伤发生的机制【目的要求】【实验设计原理】通过肠系膜上动脉结扎，即SMAO(SuperiorMesenteryArteryOcclusion)来阻断部分肠的血液供应一段时间后再恢复血流灌注，以复制肠缺血/再灌注损伤的动物模型，探讨缺血/再灌注损伤的发生机制Ⅰ组：持续缺血组结扎肠系膜上动脉2hⅡ组：缺血-再灌注组结扎肠系膜上动脉1h，再恢复血流1h【实验分组】【实验动物】家兔（性别、体重）【实验方法与步骤】1.称重2.全麻（耳缘静脉注射乌拉坦4ML/kg）★麻醉效果：角膜反射基本消失，钳夹家兔大腿肌肉无反应3.仰卧固定（背部交叉）、备皮

3、颈部正中（甲状软骨下缘→胸骨上切迹）腹部正中（剑突下1.5cm起向下5-10cm）★注意：平贴皮肤剪毛，勿拎起皮肤！4.颈部正中切口进行颈动脉插管切口范围：颈部正中，甲状软骨下缘→胸骨上切迹，长约5-10cm左侧颈总动脉：胸骨舌骨肌与胸锁乳突肌之间深面的颈动脉鞘内，与气管平行，颜色鲜红、触之有搏动感，长约2-3cm注意：（1）钝性分离（2）辨清颈A鞘内的血管神经先结扎远心端，后夹闭近心端，剪口部位尽量靠近远心端，成45度角朝向近心端剪一小口，约为管径的1/3-1/2，插管方向朝向近心端，插入1-1.5cm【插管的注意事项】插管内事先应加入肝素以防凝血；排净气泡，记录前应关闭

4、三通管插管易滑脱，应双线固定，结扎牢靠勿使插管尖端与血管壁形成角度，避免刺破血管，或者管子被血管壁堵住测不出数据5.腹部正中切口：腹正中线自剑突下1.5-2cm起向下做8-10cm切口※6.寻找肠系膜上动脉：将家兔腹腔内脏向左上方推，找到齐右肾门对侧垂直向腹主动脉分出的肠系膜上动脉，穿双线，待血压稳定后结扎（缺血再灌组结扎时注意垫橡皮管）肠系膜上A示意图：1.移动内脏时，动作要轻柔2.分离肠系膜上A时需小心细致，不要使用锐利器械，以免损伤血管造成大出血3.肠系膜上A夹闭要彻底，结扎时注意垫橡皮管，恢复血流灌流（复流）要完全【注意】6.分组进行试验并记录以下指标/夹闭【思考题

5、】模型复制是否成功？比较两组所得的结果有何不同？实验过程中各组血压变化的机制是什么？【缺血再灌注损伤的发生机制】（1）活性氧的作用（2）钙超载（3）白细胞的作用（4）高能磷酸化合物生成障碍（1）尽早恢复血流灌流，缩短缺血时间（2）再灌注时遵循低压、低温、低钙的原则（3）清除活性氧（4）Ca2+拮抗剂的使用（5）减少白细胞的激活和炎性介质的释放（6）补充能量及促进能量生成（7）启动细胞内源性保护机制【如何防治I/R】【实验报告要点】1.实验名称2.实验目的3.实验动物、器械和药品4.实验步骤5.实验结果（列表）6.实验讨论7.实验结论