毛细管电泳激光诱导荧光检测蛋白质

《毛细管电泳激光诱导荧光检测蛋白质》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号学号611700200671163学校代码10487密级硕士学位论文毛细管电泳激光诱导荧光检测蛋白质学位申请人徐：飞学科专业：生物化学与分子生物学指导教师：刘笔锋教授答辩日期：2008.5.28AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceProteinAnalysisbyCapillaryElectrophoresisCouplingwithLaserInducedFluorescenceD

2、tectionCandidate:XuFeiMajor:BiochemistryandMolecularBiologySupervisor:Prof.LiuBifengHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaMay,2008独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均

3、已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：

4、年月日本课题受到的科研项目资助：本课题受到国家自然科学基金项目（20405006，30570468，30600134）和国家“973”计划重点基础性研究项目（2007CB914203，2007CB714507）的资助华中科技大学硕士学位论文摘要随着后基因组时代的到来，生物研究的重心逐渐从DNA、RNA等遗传物质转移到蛋白质等功能物质上来。蛋白质组学研究，尤其是单细胞蛋白质组研究对当前的生物大分子分离、分析技术提出了新的要求。毛细管电泳曾以其快速高效的特点极大的推动了人类基因组计划的完成，并大大降低了开销。而在蛋白质

5、分离分析领域，毛细管电泳又以其纳升级的进样量，纳摩尔级的检测极限和极高的分辨率越来越发挥出难以取代的作用。本文主要研究了基于毛细管电泳的高灵敏度、高分辨率的蛋白质分离、激光诱导荧光检测系统的构建以及标准蛋白质样品毛细管电泳分离条件的摸索。本系统采用毛细管无胶筛分电泳模式，蛋白质样品在进样之前用FQ荧光发生试剂进行衍生，得到具有荧光特性的蛋白质-FQ衍生物。使用3万伏高压电源进行电泳分离、蛋白质-FQ衍生物在波长为488纳米的氩离子激光诱导下产生荧光，荧光信号再通过滤镜组被光电倍增管收集放大，滤波，通过数据采集程序采

6、集，得到三种标准蛋白质的电泳图谱。通过对图谱中分离度、峰高和灵敏度等参数的分析，改变缓冲液pH、分离场强、筛分介质浓度和SDS浓度等一系列分离相关的条件，获得较好的分离效果，基本达到高灵敏度、高分辨率的要求。关键词：毛细管电泳蛋白质激光诱导荧光I华中科技大学硕士学位论文AbstractHigh-throughputsequencingandfunctionalgenomicstechnologieshavegivenusadraftofhumangenomesequence.Thefocusisnowshiftin

7、gtodownstreamfunctionalmoleculeslikemicroRNA,snRNAandprotein.Proteomicresearch,especiallysinglecellproteomicsaskfornewananylistechnologieswithhighersensitivityandbetterresolution.Capillaryelectrophoresis(CE)playedacriticalroleinHumanGenomeProject,acceleratingt

8、heprogress,minimizingthecost.ItalsohasmuchadvantageonProteomicswithinjectionvolumeaboutseveralnanoliters,lowdetectionlimit(nanomole/L)andultrahighresolution.Inthisthesis,weinvestig