三株硫氧化细菌(sob)生理生化及系统发育的研究

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3、ancecetrimoniumbromideDNADatabankofJapandeoxynucleosidetriphosphateethylenediaminetetraaceticacidEuropeanMolecularBiologyInstitutepolyyacrylamidegelelectrophoresispolymerasechainreactionribonucleasesodimdodecylsulfateSulfur--oxidizingBacteria喇s_—ⅪrateEIyI.AbufferTris,EErI.AbufferTransmissionElectr

4、onMicroscopyN,N,N’-N'-Tetramethylethylenediamine中文名称美国模式培养物保存中心酸性矿水吸光值六烷基三甲基溴化铵日本DNA数据库脱氧核糖核酸酶乙二胺四乙酸欧洲生物信息学研究所聚丙烯酰胺凝胶电泳聚合酶链式反应核糖核酸酶十二烷基硫酸钠硫氧化细菌Tri㈣ml/EDTA缓冲液Tris/EDTA缓冲液透射电子显微镜四甲基二乙胺兰州大学硕士毕业论文摘要硫是自然界存在的重要元素之一,在生物地球化学循环中,微生物参与的硫的循环反应是构成大自然能量物质循环的主要途径之一。硫氧化细菌(SOB)nT以将单质硫或还原态的硫化合物氧化成硫酸盐,因此在微生物浸矿、微生物脱

5、硫等方面有广阔的的应用前景。从我国广东大宝山铜矿、新疆富蕴铜镍矿、江西永平铜矿的酸矿废水中分离得到三株硫氧化细菌DBS-4、FY-2、YP-5,对其进行形态学观察、生理生化性状分析以及系统发育研究。通过光学显微镜染色、活体观察及透射电子显微镜的观察发现,这三株硫氧化细菌均为革兰氏阴性菌,杆状(O.5~1.5x0.2~0.4um)、运动、无荚膜、不产孢予:最适生长温度为30"C,三株细菌在pm.5~6.5均可生长,DBS-4,FY_2,YP-5的最适初始pH分别为5.5、4.5、6.5;可以利用单质硫、硫代硫酸盐、连四硫酸盐生长,而不能单独利用各种有机物和Fe2+作为碳源和能源生长,但同时发

6、现以单质硫作为能源的时,加入0.02%的酵母浸膏,可以促进其生长,说明分离得到的三株硫氧化细菌为中度嗜酸的混合营养型细菌。通过16srRNA基因序列分析,并构建系统发育进化树,发现它们与几株未鉴定到种的Acidithiobacillus.spp.菌株同源性最高,达到了99%以上,与AcidithiobaciUus.caldus的同源性分别为91.9%,93.2%,90.O%,而与Acidithiobacillus.thiooxidans和Acidithiobacillus.ferrooxidans亲缘关系相对较远,同源性都在90%以下。综合表型特征及系统学研究结果,说明这三株硫氧化细菌(D

7、BS--4,FY-2,Ⅵ,_5)均属于嗜酸硫杆菌属Acidithiobacillus.此外,对三株细菌的金属离子耐受性研究表明,DBS--4对cu2+和zn2+的耐受性最强,而对Ni2+最敏感;YP-5对NP的耐受性最强,而对Cu2+最为敏感:三株细菌对Mn2+的耐受性相差不大,在80mM浓度下生长均受到抑制。全细胞蛋白电泳图谱分析表明,三株细菌与At.thiooxidansATCC19377TAt.ferrooxida

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