还原糖测定方法的比较.doc

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1、还原糖测定方法的比较*李雪梅1，2杨俊慧2张利群2孟庆军2史建国2（1山东大学化学与化工学院济南250100）(2山东省科学院生物研究所济南250014)摘要：采用手工费林滴定和还原糖测定仪两种方法测定了不同样品中还原糖含量。对测定结果的对比分析表明:手工费林试剂法易受很多因素的干扰，不同测定人员之间的误差较大；还原糖测定仪的误差范围小、重现性好、准确度较高。关键词：还原糖，费林试剂，还原糖测定仪Abstract：Reducingsugarinsaccharficationprocesseswasdetermined

2、withbothanalyzerandtheconvenientmethodofFehlingreagent.Theresultsindicatethattheanalyzercandeterminereducingsugarmoreaccurately.Keywords：reducingsugar;Fehlingreagent;reducingsugaranalyzer.还原糖测定方法研究和应用已有百年的历史。很多经典的还原糖测定方法如Lane-Eynong、高锰酸钾滴定等方法至今仍在生产、科研实验室广泛使用[1]

3、。在食品及发酵工业中，费林试剂滴定法常用来测定糖的含量。其特点是简单、方便、设备投入少，如严格按操作要求，可以进行准确的测定。但由于反应温度、摇动力度和次数、滴定速度等因素对测定都有影响，导致不同测定者之间的测定结果出现偏差[2]。本研究对费林试剂滴定和还原糖仪器测定结果进行了比较，对产生测定误差的原因进行了探讨，为进一步提高费林试剂滴定方法的准确度提供了新的依据。1材料与方法1.1测试材料1.1.1试剂费林甲液：硫酸铜35.0g，1%次甲基兰5mL，定容至1000mL。费林乙液：氢氧化钠126.4g，酒石酸甲钠11

4、7.0g，亚铁氰化钾9.4g，定容到1000mL。0.203%、0.416%、0.590%、0.822%标准葡萄糖样品：分别称取烘干葡萄糖2.03g、4.16g、5.90g、8.22g，定容到1000mL。1.1.2还原糖测定仪山东省科学院中日友好生物技术研究中心提供（名称：全自动还原糖测定仪SGD-Ш型）1.2方法：1.2.1费林滴定1.2.1.1空白试验：取费林林甲乙液各5mL于250mL三角瓶中加水10mL，并预先加入20mL0.1%标葡萄糖溶液，混合后于电炉上加热，使溶液在2min内沸腾，以每分钟20滴的速度

5、滴定至兰色刚好消失，记录体积。1.2.1.2样品滴定：取费林试液各5mL，加入样品及适量0.1%标准葡萄糖溶液，使其接近终点，以下操作如空白。滴定时应用0.1%标准葡萄糖溶液以不超过1mL为宜，否则应另取样重做。根据滴定液的体积计算还原糖含量。1.2.2还原糖测定仪操作步骤：接通电源（220V），进入待机状态。（1）开机：按“开/关”键，自动启动程序。仪器自动进行空白对照测定，完成对照测定后自动进入定标程序，试剂泵启动后，用微量注射器将标准品注入反应池，完成后仪器自动定标；（2）测定：定标后仪器自动进入测定程序。试剂

6、泵启动后，用微量注射器将待测样品注入反应池，自动完成还原糖测定并打印。2结果与分析分别在6个不同的测定地点（包括生产厂化验室和专业分析部门）用费林试剂滴定法测定不同浓度的标准葡萄糖样品，结果见表1。表1不同地点对标准葡萄糖样品的测定结果标准葡萄糖/％0.2030.4160.5900.822测定1/％0.440.610.931.11测定2/％0.220.440.620.87测定3/％0.400.540.651.00测定4/％0.160.360.560.76测定5/％0.190.460.640.84测定6/％0.180.

7、440.580.90平均值/x0.270.480.660.91标准差/S0.120.090.140.12RSD/%44.418.821.213.2采用还原糖测定仪分别于2月2日（测定1）、2月6日（测定2）、2月8日（测定3）、3月13日（测定4）、3月21日（测定5）和3月20日（测定6）6次对不同浓度的标准葡萄糖样品进行测定，测定结果见表2。表2不同时间对标准葡萄糖样品的测定结果标准葡萄糖/％0.2030.4160.5900.822测定1/％0.2410.4660.6130.844测定1/％0.2160.4170

8、.5880.813测定3/％0.1970.4220.5960.841测定4/％0.2030.4110.5970.817测定5/％0.2030.4020.5710.796测定6/％0.1930.4060.5850.796平均值/x0.2090.4210.5920.818标准差/S0.0180.0230.0140.021RSD/%8.615.462