降压物质检查法操作规程

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1、降压物质检查法操作规程:1简述本法系比较一定量的组织胺对照品与供试品引起麻醉猫血下降的程度，以确定供试品中降压物质的含量是否符合规定的一种方法。2实验材料及用具2.1天平精度0.lmg或0.Olrng对照品或供试品称量用精度lmg试剂称用量精度10g动物称重用2.2血压记录装置记录仪、汞柱血压计、压力传感器或记纹鼓、描记杠杆、汞柱血压计。2.3实验用具手术台、注射器（lnil精度0.02ml,5ml精度0.2ml）吸管、移液管、容量瓶、带塞小瓶、安瓶、测量尺、三通开关、脱脂棉、绳、线。2.4手术用器械剪毛剪、手术剪、眼科直蹑、眼科弯银、手术刀、止血银、气管插管、动静

2、脉夹及插管。2.5试剂氯化钠、苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、肝素钠及其他试剂。3溶液配制3.110%苯巴比妥钠溶液称取苯巴比妥钠适量，加水配成10%溶液（必要时加热溶解）。3.25%戊巴比妥钠溶液称取戊巴比妥钠适量，加水配成5%溶液（必要时加热溶解）。或用其他适当浓度试剂。3.3生理盐水称取氯化钠适量，加水配成0.9%溶液。3.4肝素钠溶液称取肝素钠适量，乘以每毫克标示效价单位，得肝素总单位数，加生理盐水配成1000u/ml溶液。3.5对照品溶液取磷酸组织胺对照品，放置至室温。割开对照品小管，（注射勿使玻屑掉入）精密称量磷酸组织按适量。将称取的毫克数乘以0.362,换算出

3、组胺的实际重量（mg）。加水将组胺溶解配成1.0mg/m1的对照品溶液，分装于安瓶中，熔封，置4〜8°C保存用，在确保降压活性符合要求的前提下，可在3个月内使用。实验当FL取岀组按溶液，放置至室温。割开安瓶，精密量取组胺溶液适量，用生理盐水配成0.5ug/ml的稀释液。3.6供试品溶液按屮国药典正文规定的剂量，配成适当浓度的供试品溶液。实验时，一般要求供试品溶液与对照品稀释液的注入体积相等。4实验动物健康无伤，体重2kg以上的猫，雌雄均可，雌者无孕。5检定法5.1麻醉动物和手术5.1.1将动物称重用注射器吸取10%苯巴比妥钠溶液（1.2ml/kg）和5%戊巴比妥钠（

4、0.2ml/kg）混匀，腹腔注射麻醉动物。也可用其他麻醉药品麻醉动物。5.2动物麻醉后，仰卧固定于手术台上（动物需保持体温，必要吋采取保温措施），沿颈部正屮线切开，分离气管，并插气管插管，必要时可接人工呼吸机。5.3分离一侧颈动脉，剥离附着的脂肪组织和神经，并在动脉底下穿二根线，一线靠远心端将动脉结扎，近心端用动脉夹夹住。5.4分离一侧股静脉。6测压装置和记录仪的调节（以压力传感器和记录仪法操作步骤说明）。6.1将汞柱血压计、动脉插管、压力传感器与记录仪连接好。6.2用生理盐水将压力传感器、汞柱血压计和动脉插管屮的空气排尽（每个连接处必须牢固，不漏气，如漏气会影响血

5、压的测量）。6.3接通记录仪的电源6.4灵敏度或基线的校正，用生理盐水加压，将汞柱血压计液面升高到100mmlIg（13.3kPa）,调节记录笔的振幅为合适高度或满量程；将汞柱血压计液面冋到0时，记录笔也相应冋零点基线，反复数次调节使稳定，并关上记录笔，并将压力换能器与泵柱血压计的通道关闭。6.5在颈动脉上剪一小口，插入动脉插管，（或用12号短钝针头）并用另一线结扎固定插管与动脉，使插管和动脉处在自然状态下，避免使动脉扭曲，影响血压的测量。6.6打开动脉夹，从插管上的三通屮注入1000u/ml肝素溶液0.4ml左右，以防液凝固堵塞插管影响血压测量。6.7用生理盐水将

6、静脉插管屮的空气排尽，在股静脉上用针头扎孔，插入静脉插管，（或用头皮针），固定插管，同时注射适量肝素溶液抗凝（不超过300U的肝素）。6.8手术全部完毕后，用少许脱脂棉蘸生理盐水后覆盖在动、静脉插管处。6.9正常血压值的测量接通记录笔，走纸记录正常血压（适当调节记录笔的位置）。7动物灵敏度的测定7.1使i昂仪慢速走纸》擁幽I2®从静脉插管屮注入纽W'J照品稀释液0.5ug/ml,0.1ml/kg立即注入适宜体积生理盐水，将药液冲入体内，记录血压下降曲线。7.2当血压回升恢复到基线时，使记录仪慢速走纸，注入第二针对照品稀释液1.0ug/kg,0.1ml/kg,立即注入

7、适宜体积的生理盐水，将药液冲入体内，记录血压下降曲线。7.3血压恢复正常值后，使记录仪慢速走纸，注入第三针对照品稀释液1.5口g/kg,0.lml/kg,立即注入适宜体积的生理盐水，将药液冲入体内，记录血压下降曲线。7.4重复给药2-3次。7.5如0.10ug/kg剂量所致的血压下降值均不小于20mmIIg（2.67kPa），同时相应各剂量所致反应的平均值有差别，可认为该动物的灵敏度符合规定。7.6灵敏度和给药时，相邻两次注射的间隔时间应保持一致，每次给药应在前一次反应恢复稳定以后进行。8给药（按ds、dT、dT、dS）顺序8.1给药前记录仪慢速走纸，按0.10