复方地龙胶囊对哮喘小鼠血清il-13的作用

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1、复方地龙胶囊对哮喘小鼠血清IL-13的作用崔素华1、2丁伯平1黄维琳2唐国华3(1皖南医学院药理教研室安徽芜湖241000)(2安徽中医药高等专科学校安徽芜湖241000)(3芜湖市第一人民医院安徽芜湖241000)【摘要】目的探讨复方地龙胶囊对哮喘小鼠血清白细胞介素-13CIL-13)的作用，从分子水平研究其治疗哮喘的可能机制。方法釆用卵白蛋白腹腔注射致敏建立小鼠支气管哮喘模型，用复方地龙胶囊、地塞米松与牛理盐水对小鼠进行干预，用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素(IL-13)的

2、表达水平。结果哮喘模型组小鼠血清ILJ3含量显著高于正常对照组(P<0.01);复方地龙胶囊各剂量组及地塞米松组ILJ3含量水平均明显低于哮喘模型组(P<0.05)；复方地龙胶囊各剂量组与地塞米松组比较，差异不显著(P>0.05)o结论复方地龙胶囊可能通过影响哮喘小鼠血清IL-13的水平，调节免疫系统产牛治疗作用。【关键词】复方地龙胶囊哮喘IL-13支气管哮喘是由多种细胞包括气道的炎性细胞和结构细胞(如嗜酸粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、平滑肌细胞、气道上皮细胞等)和细

3、胞组分参与的气道慢性炎症性疾病［1］。流行病学研究表明，哮喘的发病率和病死率具有全球性上升的趋势［2］。据世界卫生组织估计，全球大约有3亿哮喘患者。防治哮喘己成为全球公共卫牛问题。哮喘的主要特征是气道嗜酸性粒细胞浸润、支气管痉挛和气道高反应。免疫反应在哮喘的发病机制中占有重要地位。根据细胞因子分泌及效应功能的不同，抗原特异性CD4+T细胞分为1型辅助性T淋巴细胞(Thl)和2型辅助性T淋巴细胞(Th2)两类。现研究认为哮喘发病的重要基础是Thl/Th2细胞类细胞因子比例和功能失衡［3］。Thl和T

4、h2细胞之间处于相互抑制状态，两者形成复杂有序的细胞因子网络，调节正常的免疫应答。正常情况下，两者处于一种平衡状态。Th细胞中的Thl/Th2平衡失调，Th2细胞数目增多及功能亢进是哮喘发病的重要基础之一［4］。哮喘时浸润至气道的主要为Th2细胞,Thl细胞相对较少；由Th2细胞所产生的Th2类细胞因子IL・5、IL-13等在哮喘气道表达的mRNA及蛋白水平均过度增高;ThI类细胞因子如IFN-r相对不足oIFN-r和IL・5、IL-13分别是ThI和Th2免疫反应的代表性细胞因子，体现着ThI和

5、Th2细胞的主要生物学效应。"2类细胞因子11_・5、IL-13等产生增多，而Thl类细胞因子IFN・r等产生减少，从而导致B细胞合成增多、嗜酸性粒细胞活化浸润气道及气道高反应性。因此调节Thl/Th2平衡对哮喘的治疗具有重要意义，促进ThO细胞向ThI细胞分化，抑制Th2型细胞因子的产生，调节Thl/Th2的反应失衡可能用于防治哮喘。由于Th2细胞因子在哮喘等过敏性炎症的发生发展中起的重要作用，以此为靶点的研究是目前哮喘治疗研究中的热点［5-8］o1材料与方法1.1实验对象48只清洁级健康小鼠，

6、体重30±2g,雌雄各半，购自南京青龙山实验动物中心。1.2主要仪器全自动电子雾化器（南京道芬电子仪器厂），80・2型离心机（上海手术机械厂），微量移液器（上海求精玻璃仪器厂），电热恒温水箱（上海医用恒温设备厂），酶标仪（美国Costar公司）。1.3主要试剂卵白蛋白（合肥博美生物科技有限责任公司）、复方地龙胶囊（南京恒生制药厂,批号:Z199991007）＞小鼠白细胞介素13定量检测试剂盒（ELISA）（深圳晶美生物公司）。1.4动物分组48只小鼠随机分为6组，每组8只。A组为空白

7、对照组，B组为哮喘模型组，C组为复方地龙胶囊高剂量组（0.9mg/g/d）,D组为复方地龙胶囊中剂量组（0.6mg/g/d）,E组为复方地龙胶囊低剂量组（0.3mg/g/d）,F组为地塞米松激素治疗组（1.5mg/kg/d）o1.5建立模型采用鸡卵清蛋白(OVA)腹腔注射及雾化吸入方法制造小鼠哮喘模型。小鼠适应性饲养一周，空白对照组以生理盐水致敏和引喘，其余各组于dl、8天分别腹腔注射含10%OVA100ug.明矶2mg混悬液0.3ml致敏，两周后小鼠逐个放入体积约5L的透明密闭容器中，雾化吸入1

8、%OVA(200mgOVA溶于生理盐水20ml)20分钟，连续7天，小鼠出现明显腹肌收缩、鼻部潮湿、喷嚏、紫纟甘、烦躁、激惹等呼吸道症状，证明激发成功。1.6治疗方法空白对照组、哮喘模型组在每次激发前lh以生理盐水灌胃，地塞米松组在每次激发前lh腹腔注射1.5mg/kg地塞米松注射液，复方地龙胶囊高、中、低剂量组在每次激发前lh分别予小鼠复方地龙胶囊0.9mg/g>0.6mg/g、0.3mg/g灌胃。1.7标本获取全部动物于末次激发后lh,眼眶动脉取血牛5ml。所取血液在4°C,4