免疫学实验流式cba多因子检测

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1、【嘉美实验】虽然液相蛋白立量检测的技术很多,但是大多数的技术仅能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐,H各指标间差异性较人。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。日常实验小，常需对溶液体系屮的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一-般常规方法的检测卜限，使用常规的蛋门检测方法WesternBlot等很难检测。为此，著名的流式抗体公司BD-Pharmingen开发了棊于流式细胞仪的液相蛋白定量技术——CBAo嘉美牛物是该技术在国内最早的推广者,并同时为广大牛命科学

2、研究者提供流式CBA的检测外包服务。CBAI作原理：CytometricBeadArray(CBA),即细胞因子微球检测技术。是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。BD公司利用流式细胞仪可对荧光信号进行级数放人的特性，将受检的可溶性因子附着于一些具有近似细胞直径的微粒上，即可对受检样品中的各种可溶性因子进行检测。CBA的基木原理近似于EUSA的检测，即利用微小、分散的颗粒捕获液体待测物，并利用流式细胞仪检测类似“三明治”的颗粒一待测物复合体所散发的荧光，从而测定待测物的数量。♦CaptureAbCaptureCeadAnalyteofint

3、erestFliroescentdetectionAb详细原理介绍：每个CBA微球大小--致，具有特楚的荧光强度，包被有适川于特处分析(如英它抗体或者町溶性蛋白)的特界性捕获抗体(CaptureAntibody),提供了类似ELISA孔板的捕获表而。当微球和待测样品溶液混合后，微球上的特界性抗体就与样品(血淸、血浆或者细胞培养液)中相应的抗原或蛋白结合，然后加入荧光标记的检测抗体，就会形成“三明治”夹心复合物。最后通过流式细胞仪对特杲性冃的蛋白进行检测。CBA的每种微球携帶冇不同强度的红色荧光,在流式细胞仪的FL3通道通过检测微球荧光强度的差杲对目的蛋白定性；检测抗体带冇PE荧光素标记，在流式

4、细胞仪的FL2通道检测，通过检测抗体的PE荧光强度处量H的蛋口。3hincubationOneStepCBA技术特点：CBA是集ELISA和细胞流式技术优点为一身的液相蛋门检测技术。CBA的何一种微球提供一种蛋白的捕获表面，捕获微球与待测样晶后，呈悬浮态，与ELISA相比，能更有效地捕获被分析物；CBA具有FCM的宽范围荧光检测特点，对样本需求量更少，检测更快速、更准确。下面我们介绍一下CBA主要的技术特点：1、轻松实现多重检测。最多可同时对一个样本中的75个口的蛋门进行粘确定量。2、样本需要量小。仅需要50UL溶液就可进行一次检测。3、更高的灵敏度。分析灵敛度高达2.8pg/mLo4、更高的

5、灵敏度、更宽的检测范围和更好的重复性。CBA技术使蛋门定量的分析灵敏度高达pg/ml级别，检测范圉达0-5000pg/ml,所有分析只需一组标准曲线。根据抗体的荧光强度对口的蛋门定量，排除了ELISA反应屮酚联放大产生的假阳性。5、检测对象的灵活组合一BDCBAFlexSet。CBAkit是同时检测试剂盒配好的6个指标,形式比较固定。为满足不同客户的实际需要和研究兴趣，BDT2005年初推出了CBAFlexset。它改变了CBAkit的固定形式，成为自由组合、灵活搭配的“自助餐”°您可以根据需要组合不同的捕获微球来检测多个指标,最多能同时检测75个指标。除了拥有CBAkit的优势外,FlexS

6、et还配有独立的软件分析系统(CBAFlexSetAnalysisSoftware),并且可以在BDF?CSArrayBioanalyzer上，玄接用96孔和384孔板进彳亍操作。CBAFlexset赋予研究者更灵活、更自由，更大的选择空间，而且进一步丰富了CB八产品线。种类涉及免疫、细胞信号传导、细胞凋亡等许多领域的蛋白定量分析。6、操作简单，省时省力。CBA技术采用芯片式集成测定，所有检测只需一组标准Illi线，就可计算出每种待测蛋白浓度；操作简单，整个流程只需要3.5小时，对待测样本可做实时分析，缩短检测了时间，提髙了检测效率。7、强大的软件分析系统。BDCBA软件具有强人的数据处理能

7、力，立接将冃标蛋白的检测结果换算成标准浓度；除了为用户提供待测物的计数结果外，述能提供可视轮廓或信号图形以帮助用八获得更多的信息。有用TMacintoshfllMicrosoft系统两种版本供您选择。和传统的液相蛋白定量技术相比，CBA技术是一种“多元”和“同步”的检测技术。革新的CBA技术与传统的蛋门定量相比有下列优点：传统ELISA流式CBA检测技术单项检测多参数检测需要抗原包被操作方使，节省