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1、GSTM1基因多态性和鼻咽癌遗传易感性探究进展【摘要】目的分析GSTM1（谷胱甘肽转移酶基因）的多态性与NPC（鼻咽癌）遗传易感性的关系。方法选取我院2009年2月一一2012年2月收治的78例NPC患者作为观察组。另选取78例与观察组患者同民族，同性别，同居住地，年龄相近，无血缘关系的正常人群作为对照组。应用内参照（PRC）法检验156例患者GSTM1的基因型。结果观察组GSTM1基因空白基因型概率为65.38%；对照组空白基因型概率为44.87%；与对照组相比，观察组空白基因型概率更高（P=0.01
2、）,0R=1.840,95%CI=1.045-3.146O其中，鳞癌患者空白基因型概率为67.61%；腺癌患者空白基因型概率为42.86%；与腺癌患者相比，鳞癌患者空白基因型概率更高（P0.05,x2=3.26）o对照组和观察组中吸烟人群中空白基因型概率比较，差异具统计学意义（P0.05,具备可比性。采集两组外周静脉血，均进行EDTA（抗凝）。1.2方法1.2.1进行流行病学的相关调查全部调查员均接受统一培训。应用统一的调查表格。调查员逐一与研究对象面谈。具体调查内容如下：职业史，现病史，家族肿瘤史，治
3、疗方法，饮酒史，吸烟史，既往病史，一般情况等。1.2.2提取DNA我们应用苯酚，异戊醇，氯仿及蛋白酶K消化法提取研究对象的DNAo经光度计（紫外分光）定量后，备用。1.2.3内对照检测我们采用DNA热循环仪（型号：PE2400）o应用PRC引物（2对）。其中1对为GSTM1的基因引物，可扩增基因外显子中4的5端至5的3端。包含内含子4在内的273bp的引物［3］。序列的上游为：5-CTGCCCTAGTTGATTGATGGG-3［4］。序列的下游为：5-CTGGATTGTAGCAGATCATGC-3［5］
4、。另1对为内参照引物。它为350bp长的人类白蛋白基因片段。序列上游为：5-GCCCTCTGCTAACAAGTCCTAC-3。序列下游为：5-GCCCTAAAAAGAAAATCGCCAATG-3o反应体系：50uLo包括：34uL的ddH20,5uL的PRC缓冲液,4uL的dNTPs（2mmoL/L）,4uL引物（每种各1uL）,luLDNA模板（20mg）o预变性，然后加入液体石蜡和1UTaqDNA的聚合酶（华美公司）。具体反应条件：95°C预变性lOmin；然后，变性lmin（95°C）；退火lmi
5、n（55°C）；延伸2min（72°C）；循环35次；延伸8min（72°C）o然后，将反应物置于琼脂糖凝胶板（2%）上，100V,电泳30mino再进行EB染色（lOmin）。最后，应用透射分析仪（紫色）观察结果。以273bp片段判断GSTM1的基因型。1.3统计学处理应用SPSS19.0统计学软件，应用x2检验，以比值比（OR）及其95%可信限（CI）表示相对危险度。2结果2.1两组基因多态性结果比较观察组GSTM1基因空白基因型概率为65.38%；对照组空白基因型概率为44.87%；与对照组相比，
6、观察组空白基因型概率更高(P二0.01,x2=6.63)o见表1。若将GSTM1基因空白基因型看作暴露因素，OR二1.840,95%CI=1.045-3.146□提示，与非空白基因型个体相比，空白基因型个体患NPC危险性更大，见表1。2.2NPC的病理类型和基因型之间的关系鳞癌患者空白基因型概率为67.61%；腺癌患者空白基因型概率为42.86%；与腺癌患者相比，鳞癌患者空白基因型概率更高(P0.05,x2=3.26)o对照组和观察组中吸烟人群中空白基因型概率比较，差异具统计学意义(P3讨论相关研究表明
7、[6],90%以上的肿瘤发生与致癌因子有关。人群对致癌因子的反应具有明显差异。肿瘤易感性受肿瘤易感基因的影响。NPC是我国较为常见的恶性肿瘤。广东,广西等地区是NPC的高发区域。NPC的主要危险因素为吸烟。EE病毒是NPC的首要病因。EE病毒分布广泛，感染率较髙。癌症往往由多种因素共同作用所致，单纯EB病毒感染，不可能形成NPC高发区。NPC具有显著的遗传易感性及家族聚集性。因此遗传因素和环境因素受到越来越多人的关注。GSTM1基因属于GSTM基因家族。相关研究表明[7],头颈癌,膀胱癌，肺癌等与吸烟有
8、关的癌症的发生及发展，与GSTM1密切相关。本研究中，通过对比NPC患者与健康人群发现，观察组GSTM1基因空白基因型概率为65.38%；对照组为44.87%；与对照组相比，观察组空白基因型概率更高(P=0.01,x2=6.63)o鳞癌患者空白基因型概率为67.61%；腺癌患者空白基因型概率为42.86%；与腺癌患者相比，鳞癌患者空白基因型概率更高(P0.05,x2=3.26)o对照组和观察组中吸烟人群中空白基因型概率比较差异具统计学意义(
