微生物的培养与应用（讲）-2019年高考生物---精校解析Word版

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1、讲考纲微生物的培养、分离与应用，了解微生物的培养、分离与应用。讲考情考查角度考频微生物的分离与培养5年5考某种微生物数量的测定5年3考选择培养基的选择作用5年4考讲基础一、微生物的培养1．培养基（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。（2）营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。（3）种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。2．无菌技术（1）含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。（2）关键：防止外来杂菌的入侵。（3）不同对象的无菌操作方法3．大肠杆菌的纯化培养（1）

2、制备固体培养基：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。（2）纯化大肠杆菌①平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。②稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。4．菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。二、微生物的利用1．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（1）分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。（2）统计菌落数目：统计样品中的活

3、菌一般用稀释涂布平板法。（3）实验流程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。2．分解纤维素的微生物的分离（1）纤维素酶①组成：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。②作用（2）纤维素分解菌的筛选①原理　　　　②筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。③培养基：以纤维素为唯一碳源的选择培养基。④实验流程土壤取样（富含纤维素的环境）→选择培养（用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的浓度）→梯度稀释（制备系列稀释液）→涂布平板（将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上）→挑选产生透明圈的菌落。讲素养1．科学思维：分析

4、培养基的成分及其作用，比较平板划线法和稀释液布平板法的异同，选择培养基和鉴别培养基的差别。2．科学探究：设计实验探究微生物培养的条件。3．社会责任：关注有害微生物的控制及宣传健康生活。讲典例【例1】下列有关微生物培养的叙述正确的是（　　）A.通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落B.若培养基需要调节pH，应该在灭菌后进行C.用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量D.倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染【答案】D【例2】临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1）为了从样本中

5、获取致病菌单菌落，可用__________法或__________________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。 （2）取该单菌落适当稀释，用__________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。 （3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A________________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B____________；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，

6、说明_______________________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的_________________。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素__________。 【答案】（1）平板划线　　稀释涂布（平板）（或涂布）（2）涂布（3）敏感　　不敏感　　该致病菌对C的敏感性比对A的弱　　耐药菌　（4）A【解析】（1）在微生物的培养过程中，常用来分离微生物的方法是稀释涂布（平板）法或平板划线法。（2）为了使微生物在培养基上能够均匀分布，一般用涂布法将微生物接种在培养基

7、上。【例3】牛奶是微生物培养的良好培养基，牛奶在饮前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物，为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中，混合均匀，如此再重复2次。请回答下列有关问题：（1）巴氏消毒的方法是____________，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是_____________。 （2）取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在