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时间:2019-01-10
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1、荸荠花粉活力测定及贮藏寿命研究 摘要:为了解荸荠[Heleocharisdulcis(Burm.f.)Trin.exHensch.]花粉生活力和最佳体外萌发条件,分别采用I2-KI、TTC、MTT染色法和离体培养基萌发法对荸荠花粉活力进行了测定,并初步研究了荸荠花粉在常温(25℃)条件和低温(4℃)贮藏条件下活力变化的动态。结果表明,MTT染色法测定结果与离体萌发法最接近,最适宜荸荠花粉活力的快速检测;离体萌发法适宜培养基配方为1%蔗糖+50μg/mL硼酸;荸荠花粉在常温条件下50min活力降至0.29%的低水平,在
2、低温条件下5h后完全失去活力。 关键词:荸荠[Heleocharisdulcis(Burm.f.)Trin.exHensch.];花粉活力;测定方法;贮藏寿命 中图分类号:S645.3+42文献标识码:A文章编号:0439-8114(2016)10-2564-03 DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.10.028 Abstracts:TostudythepollenviabilityandinvitrogerminationconditionsofHeleocharis
3、dulcis(Burm.f.)Trin.exHensch.,viabilityofH.dulcispollenwasdeterminedbythreetestingstainingmethodsincludingI2-KI,TTC,MTTandinvitroculturemethod.Dynamicchangesofinvitropollengerminationrateunderthestorageconditionof25℃and4℃wascompared.Theresult8indicatedthatthepol
4、lendyedrateofMTTstainingmethodwassimilartotheinvitrogerminationrate,thustheMTTstainingmethodissuitableforfasttestofthepollenviabilityofH.dulcis.ThebestmediumforinvitropollengerminationofH.dulciswas1%sucrose+50μg/mLboricacid.TheinvitropollengerminationrateofH.dul
5、cisdecreasedto0.29%whenstoredat25℃for50min,whiledecreasedto0whenstoredat4℃for5h. Keywords:Heleocharisdulcis(Burm.f.)Trin.exHensch.;pollenviability;determinationmethod;storagelife 荸荠[Heleocharisdulcis(Burm.f.)Trin.exHensch.]为莎草科(Cyperaceae)荸荠属(HeleocharisR.Br.)
6、多年生草本植物,其以球茎供食用,生食、熟食皆宜,是一种重要的水生蔬菜之一。目前,中国荸荠栽培面积约为3.5万hm2,年产量75万t左右[1],荸荠栽培对于农民增收、农业增效发挥了重要作用。国内各地荸荠产区栽培的荸荠品种多为地方品种,鲜见有荸荠选育品种;荸荠育种多利用自然变异采用单株系选的方法进行,或者利用荸荠组织培养过程中产生的变异经单株选育而成,育种方法单一。开展荸荠人工杂交育种研究已成为业内共识,但相关报道较少。荸荠花粉活力高低对杂交育种成败和效率有着重要的影响,在荸荠杂交前进行荸荠花粉活力测定和花粉贮藏寿命调查,
7、可有效提高杂交效率。目前尚未见荸荠花粉测定方法和花粉保存寿命研究的报道,为此课题组开展了荸荠花粉活力测定方法比较试验,同时观察和分析荸荠花粉在离体室温(25℃)和低温(4℃8)条件下的活力变化规律,以期为荸荠杂交育种提供基础资料。 1材料与方法 1.1样品采集 荸荠花粉采集于湖北地方品种沙洋荸荠,在早晨8:00采集花药完全伸出小花、但尚未散粉的花序若干,迅速带回实验室,用镊子捏取荸荠花序中部花药1个,置于载玻片上静置20min,用于花粉活力测定方法试验;花粉寿命测定试验取样方法同此。 1.2花粉活力测定 1.
8、2.1培养基发芽法液体培养基参照胡适宜[2]提出的配方,经预备试验初步确定蔗糖和硼酸的浓度范围,按照表1组合配制9个液体培养基处理。将载玻片花药加1~2滴液体培养基,用镊子轻捣,花粉散于培养基液体后夹出花药,置室温下1h后,显微镜下观察3个视野,凡是出现花粉管伸出即认为发芽。试验采用随机区组设计,重复3次。 1.2.2I2-KI
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