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时间:2019-01-09
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1、大蒜、生姜、苦瓜混合提取液对平菇病原真菌的抑制作用及对平菇生长的影响 摘要:采用抑菌圈法研究了大蒜、生姜、苦瓜混合提取液对平菇(Pieurotusostreatus)病原真菌的抑制作用,用出菇试验法测定了混合提取液对平菇菌丝体和子实体生长的影响。结果表明,在pH9时,大蒜、生姜、苦瓜4.5:4.5:1.0质量比例的混合提取液抑制平菇病原真菌效果最好,与对照相比增产31.40%,缩短了采菇间隔。大蒜、生姜、苦瓜以4.5:4.5:1.0质量比例提取12h,pH为8、9时混合提取液抑菌效果最好,加入提取12h混合提取液的菌袋增产35.84%,缩短了采菇间隔,增大了盖柄比,提高了商品
2、性。 关键词:混合提取液;平菇(Pieurotusostreatus);病原真菌;抑制作用 中图分类号:S646.1+4文献标识码:A文章编号:0439-8114(2016)09-2283-04 平菇(Pleuyotusostreatus)属侧耳科侧耳属,是中国栽培最为广泛的食用菌之一。目前平菇生产以农户分散栽培为主,栽培管理不规范,生产过程中易受细菌、真菌为害,菇农常用多菌灵、百菌清等化学药剂进行防治,给食用菌产品带来一定的安全隐患。7 研究表明,大蒜、生姜、苦瓜等的提取液对细菌、真菌具有一定的抑制作用。为此。本试验以大蒜、生姜、苦瓜的混合提取液对平菇生产中的主要病原
3、真菌进行室内抑菌测定和平菇生产试验,以期为相关生物农药的开发应用奠定基础。 1材料与方法 1.1材料 大蒜为脱毒品种,苦瓜为航天九号(F1),均取自山东农业工程学院校内实习基地:生姜为山东绵姜,山东莱芜生产。 真菌为青霉(Penicillium)、木霉(T.viride)、拟青霉(Paecilomyces)、枝孢霉(Cladosporium)。 平菇为德丰5号,由禹城市清香园蔬菜种植专业合作社提供。 1.2方法 1.2.1大蒜、生姜、苦瓜混合提取液的制备用食品加工机将大蒜(鲜)、生姜(鲜)、苦瓜片(干)按照一定比例匀浆或粉碎。与乙酸乙酯(AR)按照质液比(m/V)
4、1:1的比例置于28℃下恒温振荡一定时间,转速120r/min。其中大蒜、生姜、苦瓜质量比例分别为4:4:2、5:4:1、4:5:1、4,5:4,5:1.0,提取时间为24h;大蒜、生姜、苦瓜比例为4.5:4.5:1.0的提取时间为4、6、12、24、36、48h;不加乙酸乙酯的为空白对照(CK):用乙酸乙酯浸泡的滤片为对照(CK1)。最后用抽滤装置抽滤得大蒜、生姜、苦瓜混合提取液,置于4℃冰箱内保存备用。 1.2.2真菌菌悬液的制备将上述真菌菌株分别经PDA培养基纯化、活化培养后。用无菌生理盐水进行梯度稀释,菌体浓度为105-106cfu/mL,置于4℃冰箱内保存备用。
5、1.2.3不同DH平板的制备PDA培养基高压灭菌后,在45℃7左右用NaOH调pH至7、8、9,无菌条件下倒入直径90mm的培养皿中即可。 1.2.4大蒜、生姜、苦瓜混合提取液抑菌效果测定①用移液枪取0,01mL“1.2.2”中制备的菌悬液于平板上。用无菌涂布棒涂布均匀:⑦用无菌镊子将灭菌后的滤纸片(直径6mm,用大蒜、生姜、苦瓜混合提取液充分浸泡20min再晾干)贴入涂菌的平板内:③将平板倒置在24℃生化培养箱中培养48h。采用十字交叉法测量抑菌圉直径。3次重复。 1.2.5大蒜、生姜、苦瓜混合提取液对平菇生长的影响①平菇栽培料配方:棉子壳90%,麦麸5%,石灰3%,石膏
6、2%,料水比1.0:1.2:培养料中分别加入培养基含水量1%的大蒜、生姜、苦瓜不同质量比例(提取24h)的混合提取液、不同提取时间(大蒜、生姜、苦瓜质量比4.5:4.5:1.0)的混合提取液,不加混合提取液的为对照(CK2):各处理水分(包括对照)调节一致后拌匀。⑦按4层菌种3层料的方式把平菇菌种接至17cm×45cm×0,04cm的聚乙烯塑料袋中。③测定混合提取液对平菇菌丝及子实体生长的影响。5次重复。 1.3分析方法 试验数据用DPS统计软件进行分析。 2结果与分析 2.1大蒜、生姜、苦瓜混合提取液对平菇病原真菌的抑制作用 2.1.1不同比例大蒜、生姜、苦瓜混合提
7、取液对平菇病原真菌的抑制作用7从表1可以看出,提取溶剂乙酸乙酯和CK对4种病原真菌均无抑菌效果:大蒜、生姜、苦瓜不同质量比例的混合提取液对4种病原真菌都有抑制作用,不同处理的抑菌效果有一定差异。4.5:4.5:1.0质量比例的混合提取液抑制效果较好,其次为比例4:5:1。 DH对大蒜、生姜、苦瓜不同比例混合提取液的抑菌效果也有一定影响,从表1可以看出,pH为9时对平菇病原真菌抑制效果最好。 2.1.2不同提取时间的大蒜、生姜、苦瓜混合提取液对平菇病原真菌的抑制作用表1结果表明,4.5:4
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