血管内皮生长因子促进少突胶质前体细胞增殖及其机制的初步研究

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时间:2019-01-06

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1、血管内皮生长因子促进少突胶质前体细胞增殖及其机制的初步研究张波,胡俊,焦岩,黄河清,陈康宁  (400038重庆,第三军医大学西南医院神经内科)[通信作者]陈康宁,电话:(023)68754154,E-mail:ckn640827@126.com[摘要]目的观察不同浓度血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)对少突胶质前体细胞(oligodendrocyteprecursorcells,OPC)增殖的影响,探索VEGF促进OPC体外增殖与Notch信号通道上相关蛋白的关系。

2、方法分离纯化培养OPC,MTT法检测不同浓度VEGF(50、100、200ng/ml)促进OPC增殖的作用以及加入Notch通路γ-分泌酶抑制剂DAPT后OPC增殖变化情况,RT-PCR、Westernblot技术检测VEGF处理OPC后Notch信号通道上Notch-1、Hes-1的基因表达和蛋白表达情况。结果50、100、200ng/mlVEGF处理组的细胞增殖率分别为(107±2)%、(124±2)%、(142±7)%,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),加入γ-分泌酶抑制剂后100ng/mlVEGF处

3、理组的增殖率下降至(103±3)%(P<0.05)。RT-PCR及Westernblot分析显示VEGF处理OPC后,Notch-1、Hes-1蛋白在基因水平和蛋白水表达均增加(P<0.05),γ-分泌酶抑制剂DAPT能抑制其表达(P<0.05)。结论VEGF对OPC具有促进增殖的作用,其促增殖作用与Nocth信号通路相关蛋白有关。[关键词]血管内皮生长因子;少突胶质前体细胞;增殖;Notch[中图法分类号]R34;R743.3;[文献标志码]AMechanismofvascularendothelialgrowthfact

4、orpromotinginvitroproliferationofoligodendrocyteprecursorcellsZhangBo,HuJun,JiaoYan,HuangHeqing,ChenKangning(DepartmentofNeurology,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing,400038,China)[Abstract]ObjectiveToobservetheeffectsofvascularendothelialgro

5、wthfactor(VEGF)withdifferentconcentrationsontheproliferationofoligodendrocyteprecursorcells(OPCs),andtostudytherelationshipbetweenthepromotioneffectofVEGFonOPCinvitroproliferationandrelevantproteinsinNotchsignalingpathway.MethodsOPCswereisolated,purified,andculture

6、d.TheinfluencesofVEGFwithdifferentconcentrations(50,100,and200ng/ml)andNotchsignalingpathwayγ-secretaseinhibitorDAPTonOPCproliferationweredetectedwithMTTassay.TheinfluencesofVEGFontheexpressionofNotch-1andHes-1inNotchsignalingpathwayatmRNAlevelandproteinlevelwerede

7、tectedwithRT-PCRandWesternblot.ResultsOPCstreatedwith50,100,and200ng/mlVEGFhadproliferationratesof(107±2)%,(124±2)%,and(142±7)%,respectively,whichweresignificantlydifferentfromtheproliferationrate(100%)ofuntreatedOPCs(P<0.05).Afterγ-secretaseinhibitoraddition,thepr

8、oliferationrateofOPCstreatedwith100ng/mlVEGFdecreasedto(103±4)%.RT-PCRandWesternblotresultsshowedthattheexpressionofNotch-1andHes-1inOPCstreatedw

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