vegf促进少突胶质前体细胞增殖及其机制的初步研究

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1、VEGF促进少突胶质前体细胞增殖及其机制的初步研究张波,焦岩,胡俊,黄河清,陈康宁  (400038,重庆,第三军医大学西南医院神经内科)作者:张波,男,硕士学位,初职,脑血管病,电话:13274921626,E-mail:poor567@msn.com[摘要]目的观察不同浓度血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)对少突胶质前体细胞(oligodendrocyteprecursorcells,OPC)增殖的影响并探索VEGF促进OPC体外增殖与Notch信号通道上相关蛋白的关系。方法分离纯化培养OPC,MTT法检测不

2、同浓度VEGF(50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml)促进OPC增殖的作用以及加入Notch通路上γ-分泌酶抑制剂DAPT后OPC增殖变化情况,RT-PCR、Westernblot技术检测VEGF处理OPC后Notch信号通道上Notch-1、Hes-1的基因表达和蛋白表达情况。结果50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml不同浓度VEGF处理组的细胞增殖率分别为:(107±2)%、(124±2)%、(142±7)%,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),加入γ-分泌酶抑制剂后100ng/mlVEGF处理组的增殖率下降至(103±3)

3、%(P<0.05)。RT-PCR及Westernblot分析显示VEGF处理OPC后,Notch-1、Hes-1蛋白在基因水平和蛋白水表达均增加(P<0.05),γ-分泌酶抑制剂DAPT能抑制其表达(P<0.05)。结论VEGF对OPC具有促进增殖的作用,其促增殖作用与Nocth信号通路相关蛋白有关。[关键词]血管内皮生长因子;少突胶质前体细胞;增殖;Notch[中图法分类号]R34;R743.3;[文献标识码]AStudyoftheproliferationandmechanismofoligodendrocyteprecursorcellspromotedbyVEG

4、FinvitroZhangBo,JiaoYan,HuJun,HuangHeqing,ChenKangning(DepartmentofNeurology,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing,400038,China)[Abstract]ObjectiveToobservetheeffectofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)withdifferentlevelonproliferationofoligodendrocyteprecursorcell

5、s,andexploretherelationshipbetweenproliferationandassociatedproteinsonNotchsignalpathway.MethodsOPCswereisolated、purified、cultivated,theeffectofVEGF’sandγ-secretaseinhibitor(DAPT)’sonproliferationofOPCswasdetectedbyMTTassay.EffectofVEGFonexpressionofNotch-1、Hes-1inOPCswasdetectedbyRT-PCR

6、andWesternblottingmethods.ResultsTheproliferationrateofOPCswas(107±2)%,(124±2)%,(142±7)%respectivelyattheconcentrationof50ng/ml,100ng/ml,and200ng/mlVEGF(P<0.05).RT-PCRandWesternblottingshowedthattherelativeexpressionofNotch-1,Hes-1inVEGFtreatedgroupwassignificantlyhigherthancontrolgroups

7、(P<0.05),inγ-secretaseinhibitortreatedgrouptheexpressionsignificantlylower((103±3)%).ConclusionVEGFcandirectlypromotetheproliferationofOPC,andthechangesofNocth-1、Hes-1mayinvolvedinthemechanism.[Keywords]VEGF;oligodendrocyteprecursorcells;proliferation;NotchCorrespondingau

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