实时定量pcr检测慢性粒细胞白血病患者shh,smo基因的表达水平

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1、实时定量PCR检测慢性粒细胞白血病患者Shh、Smo基因的表达水平朱华民1,3，李扬秋2（510632广州，暨南大学：医学院血液病研究所1，再生医学教育部重点实验室2；524001广东湛江，广东医学院附属医院3）[摘要]目的建立Hedgehog信号通路功能性基因Shh和功能性受体蛋白Smo基因的定量检测方法，并分析其在慢性粒细胞白血病（chronicmyeloidleukemia，CML）患者中的表达水平。方法利用实时定量PCR检测20例CML患者和作为正常对照(8例)的健康人外周血细胞中Shh、Smo基因的表达水

2、平，以β2微球蛋白（β2-M）基因作为内对照。结果CML组Shh、Smo表达水平均明显高于正常对照组(P＜0.05)。结论成功建立Shh、Smo基因的定量检测方法；Shh、Smo基因在CML中高表达。[关键词]Shh、Smo基因；慢性粒细胞白血病；实时定量PCR；基因表达QuantitativedetectionofShhandSmogeneexpressioninChronicmyeloidleukemiabyreal-timeRT-PCRZhuHuamin,LiYangqiu(DepartmentofHemat

3、ology，Ji′nanUniversity;KeyLaboratoryforRegenerativeMedicineofMinistryEducation，Guangzhou510632，China﹠AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege)[Abstract]ObjectiveToestablishareal-timePCRquantitativedetectionmethodforHedgehogsignalingpathwayfunctionalgenerece

4、ptorproteinSmogene，andtoevaluateitsexpressionlevelinChronicmyeloidleukemiapatients．MethodsReal-timePCRwithSYBRGreenⅠtechnologywasusedtodetecttheexpressionlevelofSmogeneinperipheralbloodmononuclearcellsfrom8normalindividuals(ascontrol)and20Chronicmyeloidleukemi

5、apatients,β2-microglobulin（β2M）wasusedasreferencetoobtaintherelativeexpressionlevelsofShhandSmo.ResultsTheexpressionlevelsofShh、SmoinChronicmyeloidleukemiapatientswassignificantlyhigherthanthoseinthenormalcontrol(P＜0.05).ConclusionThemethodforquatitationofSmog

6、eneexpressionbyReal-timePCRwithSYBRGreenⅠtechnologyhasbeenestablished;SmogeneinChronicmyeloidleukemiapatientsisofhighexpression．[Keywords]Shh、Smogene；Chronicmyeloidleukemiapatients；real-timeRT-PCR；geneexpressionCorrespondingauthor：LiYang-qiu，E-mail：jnyangqiuli

7、@163.comHedgehog信号通路是人类胚胎发育过程中调控细胞增殖和组织分化的重要信号通路。大量研究表明该信号通路在人类多种肿瘤中异常激活，并对这些肿瘤的生长起着促进作用。Hh蛋白是一个关键成形素(mophorgen)和分泌性的信号蛋白，通过自我剪接过程，可以将一个45000的前体转变为19000功能性蛋白。在脊椎动物中，编码Hh蛋白的Hh基因至少有3个同源基因：SonicHodgehog(Shh)、IndianHodgehog(Ihh)和DesertHodgehog(Dhh)。其中最重要也是研究最深的是Sh

8、h，它被认为可能与脑、脊髓中轴骨骼及淋巴发育有关。对于人类来说,Shh定位在7号染色体长臂远端，含3个外显子，cDNA长度1576bp，编码462个氨基酸的多肽，此分泌性多肽经剪切掉信号肽后，在胆固醇介导下自身催化裂解为C末端结构域（Shh-C）和N末端结构域（Shh-N）。[基金项目]广东省自然科学基金重点项目(9251063201000001)[通信作者