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《转化生长因子-β1促血管内皮细胞向间质细胞转化的作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、转化生长因子-β1促血管内皮细胞向间质细胞转化的作用研究1122122222简宇，简华刚，黄宏，徐祥，郭敏，代卉，崔文慧，蒋建新，朱佩芳，王正国1(400016重庆，重庆医科大学第二附属医院创伤烧伤科；400042重庆，第三军医大学第三附属医院野战外2科研究所，创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室)[摘要]目的观察转化生长因子-β1（transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1）对促进内皮细胞向间质细胞转化（endothelial-mesenchymal(myofibroblast)transition，EnMT）的效应，探讨肌成纤维细胞的来源以及纤维化疾病发生
2、的新机制。方法分离培养人脐静脉内皮细胞，采用不同浓度的TGF-β1（10、25、和50ng/ml）刺激细胞72h后，倒置显微镜观察诱导后细胞形态变化，免疫荧光方法检测第Ⅷ因子相关抗原和α-SMA表达变化，RT-PCR检测VE-钙粘蛋白（VE-Cadherin），α-SMA和Ⅰ型胶原基因表达变化。结果正常对照组内皮细胞呈铺路石样生长，TGF-β1刺激组内皮细胞由铺路石样形态向梭形转化。免疫荧光检测可见对照组含有少量FⅧ，α-SMA双阳性细胞。TGF-β1组FⅧ，α-SMA双阳性细胞明显增多，并且具有明显的浓度依赖性（P<0.05,P<0.01）。RT-PCR检测结果显示，TGF-β1
3、刺激导致内皮细胞特异性标记物VE-钙粘蛋白（VE-cadherin）基因的表达显著减少（P<0.05），随着TGF-β1刺激浓度的增加，VE-钙粘蛋白基因表达呈明显的下降趋势；相反，内皮细胞间质性标记物α-SMA和I型胶原基因的表达显著增加（P<0.05,P<0.01）,并且具有明显的浓度依赖性。结论TGF-β1刺激内皮细胞后，细胞表型和功能均表现为间质细胞特性，提示TGF-β1具有促进内皮细胞向间质细胞转化（EnMT）的作用，并且其促EnMT效应具有明显的浓度依赖性。[关键词]内皮细胞；肌成纤维细胞；转分化；转化生长因子-β1TGF-β1-inducedtransformatio
4、nofendothelialintomyofibroblast:astudyofroleJianYu1,HuangHong2,JianHua-gang1,GuoMin1,DaiHui2,CuiWen-hui2,ZhangBo2,JiangJian-xin2,ZhuPei-fang2,WangZheng-guo2(1Departmentofburnandtrauma,TheSecondAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016;2StateKeyLaboratoryofTrauma,BurnsandCom
5、binedInjury,InstituteofSurgeryResearch,TheThirdAffiliatedHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing,400042,China)Abstract:ObjectiveToexploretheeffectofendothelial-mesenchymal(myofibroblast）transitionofhumanumbilicalveinendothelialcellsinducedbydifferentconcentrationTGF-β1,andthechangeso
6、fcellphenotypeandfunction.MethodsHumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)wereisolatedandculturedandthenpreparedasexperimentcellsafter3passages.HUVECsweredividedintofourgroupsrandomly:PBSwasaddedtoculturemediumincontrolgroup;10,25and50ng/mLTGF-β1wereaddedtoculturemediuminTGF-β1groupsrespectiv
7、ely.Atculturingfor72hours.Thechangesofcellmorpholgywereobservedwithinvertedphasecontrastmicroscope.TheexpressionchangesofFⅧrelatedantigenandα-SmoothMuscleActin(α-SMA)wereexaminedwithimmunofluorescencemethod,andthegeneexpressionchangesof
