脂肪酶测定sop_lip临床意义

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1、脂肪酶测定版本号:页码:第页共页1检测原理当辅助脂肪酶、胆汁盐和氯化钙存在,脂肪酶能催化脂肪酶底物1,2-0-双十二烷基-rac-甘油-3-戊二酸-(6,-甲基试卤灵)酯的水解(反应图示如下)。通过水解生成不稳定的中间产物戊二酸-6'-甲基试卤灵酯。然后中间产物被H20水解生成游离的甲基试卤灵,在577nm波长上吸光。用577/700nm的双波长反应可测定脂肪酶的活性。反应的比率与样本中脂肪酶的含量成正比。1,2-0-双十二烷基-rac-甘油-脂肪酶1,2-o-双十二烷基-rac-甘油+►3-戊二酸-(6,-甲基试卤灵)酯

2、戊二酸6,-甲基试卤灵酯(不稳定)戊二酸6'-甲基试卤灵酯H.0戊二酸+甲基试卤灵(在577nm波长上吸光)►2标本采集与处理2.1采血方法空腹采不抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存血清屮的脂肪酶在室温下可保持一周的稳定性,在2~8°C下可保持三周的稳定性。2.3注意事项样本的细菌污染可能导致脂肪酶值升高。乙二胺四乙酸、草酸钾、氟化钠和柠檬酸盐已证明对脂肪酶的测试结果有抑制作用,故不应使用。标本应避免溶血、脂血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~3

3、孔为脂肪酶底物0.24mM,胆汁盐10mM,钠盐,钾盐,酒石酸盐缓冲液1.6mM,片剂;4〜6孔为三軽甲基氨基甲烷缓冲液50mM,氯化钙2.0mM,辅助脂肪酶2.8x105U/Ld,片剂;7~8孔为NaOH0.53M,液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2〜8£保存,有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。脂肪酶测定版本号:页码:第页共页3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签

4、收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。2.3标本处理以2500〜3000「/min,离心6〜lOmin,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8°C保存。2.4标本检测2.4.1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按FkENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号,按enter»在PatientName处选择性输入病人名字,按enter,在SampleNo处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组

5、合键选择相应项目,根据需耍选择相应的按键改变Mode(按F7:MEXTMODE选择样品管类型)、Priority(按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLUID选择标本类型)。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOADLIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Rim键,仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按口期放好,保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存直接使用,

6、2〜8°C保存。3.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。2.3校准程序主屏幕按F5:PR0CESSCTRL-F1:CALIBRATION,按enter-*F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator^校准液货号Calibrator脂肪酶测定版本号:页码:第页共页Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个水

7、平的值按照市低到高的顺序输到对应位置,按F4:ASSIGNCUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样品架上,按F7:LOAD/RUN-F4:RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序2.1质控品准备和储存质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10〜-70°C可保存到瓶身有效期,未开启2-8°C可保存90(1,开启后2〜8°C可保存30do6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批,每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状

8、态。7性能参数本法线性范围为50~1500U/L,对于超过测定线性范围的结果,用酶稀释液对标本进行稀释,输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间114〜286U/L。9临床意义此酶活力增高常见于急性胰腺炎。10参考文献⑴西门子医学诊断产品(上海)有限公司脂肪酶(LIP)测定试剂说明书。[2]叶应妩,王毓

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