乙肝病毒x蛋白通过激活c-myc诱导卵圆细胞的恶性转化

《乙肝病毒x蛋白通过激活c-myc诱导卵圆细胞的恶性转化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、乙肝病毒X蛋白通过激活c-myc诱导卵圆细胞的恶性转化王月飞，廖凯，卢乐乐，张雷达（400038重庆，第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所，中国人民解放军西南肝胆外科医院）［摘要］目的研究c-myc对乙型肝炎病毒X蛋白（HepatitisBvirusX，HBx）诱导卵圆细胞恶性转化的影响。方法通过HEK293细胞扩增腺病毒获得高滴度的Ad-EGFP和Ad-HBx，分别感染肝卵圆细胞株WB-F344细胞，通过RT-PCR和Westernblot验证HBx蛋白对c-myc表达的影响。应用特异性对应c-myc基因的siR

2、NA转染各组细胞。运用体外成瘤法、流式细胞术、细胞迁移实验，观察c-myc特异性siRNA对HBx诱导卵圆细胞恶性转化的影响。结果与空白对照组Ad-EGFP相比，实验组转染Ad-HBx后，细胞中的c-myc表达水平增高；WB-F344-HBx细胞G0/G1期细胞比例显著降低、S期细胞比例显著升高；第1天3组细胞都以单细胞形式悬浮生长，随着时间延长，WB-F344-HBx细胞逐渐形成致密的细胞球体并且数量逐渐增多、体积逐渐增大；WB-F344-HBx细胞的迁移能力显著高于对照组。WB-F344-Mock和WB-F344

3、-EGFP组之间各项指标均无明显差异。c-myc基因沉默后，3组细胞间各项指标均无明显差异。结论乙型肝炎病毒X蛋白通过激活c-myc基因从而诱导肝卵圆细胞恶性转化。［关键词］乙型肝炎病毒；HBx蛋白；肝卵圆细胞；恶性转化［中图法分类号］R735.7［文献标志码］AHepatitisBvirusXproteinbyactivatingthec-mycgeneinducedhepaticovalcellsmalignanttransformationWangYuefei,LiaoKai,LuLele,ZhangLeida

4、（DepartmentofHepatobiliarySurgery,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China）[Abstract]ObjectiveTodetecttheeffectofhepatitisBvirusX（HBx）proteinonovalcelllinesandtoinvestigatewhetherHBxproteincaninducehepaticovalcellstomalignanttransf

5、ormationafterc-mycgenesilence.MethodsTheWB-F344cellswasinfectedwithadenovirusexpressingHBxproteinalongwithEGFP.Theexpressionsofc-mycinthethreegroupswereconfirmedbyReal-timePCRandWesternblotanalysis.Thecellcycle,proliferation,abilityofmetastasisandtumorigenicity

6、weredetectedwithflowcytometry,metastasisexperimentandtumorexperimentinvitrorespectively.ResultsComparewithWB-F344-MockandWB-F344-EGFP,WB-F344-HBxhighlyexpressedc-mycprotein,andWB-F344-HBxcansignificantlyacceleratetheprocessofG1/Scellcycle,andhavestrongerability

7、ofmetastasisandsphereformation.Therewasnosignificantdifferenceincellcycle,abilityofmetastasisandsphereformationbetweenWB-F344-EGFPandWB-F344-Mock.Therewasnosignificantdifferenceincellcycle,abilityofmetastasisandsphereformationcompareWB-F344-HBxwithWB-F344-Mocka

8、ndWB-F344-EGFPafterc-mycgenesilence.ConclusionHepatitisBvirusXproteinbyactivatingthec-mycgeneinducedhepaticovalcellsmalignanttransformation.[Keywords]HepatitisBvirus;Hepatit