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1、目录第…部分：化学发光基础知识第1--17问第二部分：仪器应用部分第18—74问第三部分：项目应用部分第75—107问第一部分：化学发光基础知识1什么是化学发光，与放免、酶免比絞有何不同？化学发光免疫分析(ChemiluminescenceImmunoassay,CLIA)是将化学发光与免疫反应相结合，川于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。化学发光免疫分析比放射免疫，嗨联免疫具有更高灵敏度，具备操作简使、快速的特点，易于标准化操作。且测试屮不使用冇害的试剂，试剂保存期长，应用于生物学、医学研究和临
2、床实验诊断工作，成为非放射性免疫分析法中最有前途的方法z—。(1)与放免(RIA)产品比较与放射免疫试剂(RIA)比较，化学发光避免了放射性核素的污染以及对操作人员的伤害，大大缩短了反应时间，同时兼具高灵敏度的优势。(2)与酶免(ELISA)产品比较灵敏度与可测范围远远高于酶免产品，兼具ELISA法简便的操作方法与较短的反应时间。2什么是标记免疫技术，它的三大耍素是什么？将他或Ab用标记物(如荧光素、酶、放射性同位素、化学发光物质等)进行标记，在与标本屮的和应Ab或Ag反应后，对以不必测定Ag-Abfi合物本
3、身，而测定复合物屮的标记物，通过标记物的放大作用，进一步提髙了免疫技术的敏感性。三要素：通常在检测系统中会使用到一种叫标记物(labeling)的物质，常标记在抗体上通常会有一个分离(separation)的过程在最后读取信号而需要去仔细关注一下分析的模式(format)3标记免疫技术主要冇哪儿种？主要经历了四种标记免疫技术的发展：荧光素(Fluorophores)-FIA放射性同位B(Radioisotopes)-RIA酶(Enzymes)-EIA化学发光物质-CLIA4ACCESS化学发光原理？分析方法及
4、过程ACCESS系统采用磁性微粒作为固和载体，以碱性磷酸酶作为发光剂，固相载体的应用扩大了测定的范围。以竞争法、夹心法等免疫测定方法为基础。试剂包装釆用特殊的设计，每个试剂包有5个小室分别把不同的试剂分开，减少了交叉污染，保证了检测质量。⑴、抗原抗体结合：将包被单克隆抗体的顺磁性微粒和待测标本加入反应管中，标木中的抗原与微粒子表而的抗体结合，再加入碱性磷酸酶标记的抗体，经温育后形成尚相包被抗体-抗原-酶标记抗体复合物。⑵、洗涤、分离：在电磁场中进行3次洗涤，很快将未结合的多余抗原和酶标记抗体洗去。⑶、加入底物
5、AMPPD发光剂：AMPPD被结介在磁性粒子表面的碱性磷酸酶的催化卜•迅速去磷酸基因，生成不稳立的中介体AMPDoAMPD很快分解，从高能激发态回到低能量的稳立态，同时发射出光子，这种化学发光持续而稳定,可达数小时之久。通过光量子阅读系统记录发光强度，并从标准曲线上计算岀待测抗原的浓度。3化学发光项目的免疫学原理？・抗原、抗体特异性结合・小分子釆用（一步、二步）竞争结合法：一步竟争法：TotalT4,Cortisol,TUptake,Digoxin,Theophylline,TotalT3二步竟争法：FT4,
6、B12,Folate,FT3大分子釆用（一步、二步）夹心法:BhCG,hTSH,Ferritin,Prolactin,PSA,CEA,hFSHhLIIIgE4一步和二步分析法是怎么回事？同步和分步是按照：试剂/样品加入的顺序，孵育的次数（步骤），淸洗分离的次数（步骤）來区分的，像一步分析法是试剂和样品同步加入，进行一次孵育一次清洗。像二步分析法是先加入样品进行孵育和清洗后再加入试剂，进行第二次孵育和清洗。5什么是钩状效应（hookeffect）,如何判断及解决？免疫测定的实质是抗原抗体反应，抗原抗体反应是按一
7、定的分子比例结合，当二者比例适中时，形成的免疫反应最强烈，形成复合物或检测的信号与所测的抗原或抗体成比例关系，但当抗原或抗体其中一者过量时，免疫反应将减弱，测定值呈现假性低值。在化学发光中像二步分析法一般都能避免钩状效应，对于一步夹心法项目说明书中都提到了产生钩状效应的上限如人绒毛膜促性腺激素的钩状效应值是100力FlU/ml.在实际工作中如遇到测定值与临床严重不符的结果耍考虑到钩状效应，解决办法是稀释此样本。6什么是嗜界性抗体？病人样甜中可能口然产生一些针对动物免疫球蛋口的抗体（通常是鼠或羊），一•般來源丁
8、•暴露于这些动物或接受过动物血清的治疗，分析的干扰：可以在双单克隆夹心法分析模式屮引起假阳性，可以在单克隆/多克隆分析模式中出现假阴性。厂家在试剂牛产屮会加入封闭剂，封闭剂可以加在反应基质屮或整合在试剂盒内：鼠（鼠科•类），鸟（鸟科类）和羊蛋白，各个厂家生产的分析试剂都冇可能会不同程度的受到任何一个病人血清的影响！当遇到与临床不符的结果时要询问病史看是否有嗜异性抗体的干扰。7什么是基质效应？基质是指
