玉郎伞总黄酮提取工艺研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果玉郎伞总黄酮提取工艺研究【摘要】　　目的对玉郎伞总黄酮的几种提取工艺进行比较研究。方法以总黄酮得率为主要指标，辅以提取时间、提取次数、试剂用量、提取成本、人员及环境保护等因素，对传统热回流提取、微波提取、冷浸提取等3种提取工艺进行比较。结果微波提取玉郎伞总黄酮的提取率较传统热回流提取和冷浸提取高，且提取时间短、试剂用量少、成本较低。结论提取玉郎伞总黄酮以微波提取法为佳。【关键词】玉郎伞总黄酮提取工艺玉郎伞(Yulangsan,YLS)为

2、蝶形花科植物疏叶崖豆MillettiapulchaKurzvur.Laxior(Dunn)Z.WEi的块根，是广西壮族习用药材，具有补气、补血、提高免疫力、抗衰老、抗应激、改善大脑记忆等功能，用于治疗课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果老年健忘、小儿智力低下、强身健体消除疲劳、体弱多病及病后、产后虚弱等［1］。目前，在国内外只有本课题组对YLS进行了初步提取分离

3、及相关药理、药效研究。YLS成分复杂，黄酮为其主要活性成分。YLS黄酮具有降血压、抗自由基、减轻心肌缺血再灌注损伤、抑制心肌收缩力、减慢心率和增加冠脉流量等作用［2］。探索高效、稳定、低毒、低成本的提取YLS黄酮方法，对进一步的新药开发意义重大。鉴于此，作者以YLS总黄酮得率为主要指标，辅以提取时间、提取次数、试剂用量、提取成本、人员及环境保护等因素，对传统热回流提取、微波提取、冷浸提取等3种提取工艺进行比较研究。现报道如下。　1材料试剂YLS饮片、芦丁对照品；无水乙醇、石油醚、醋酸乙酯。仪器热回流提取装置、WA-812型微波提取仪、RE一52AA旋转蒸发器、DZF一

4、250型微波真空干燥箱、贝克曼紫外分光光度计、薄层扫描仪等。　2方法.1YLS总黄酮的提取.热回流提取取500gYLS饮片，按料液比＝1∶8比例加入70%乙醇，加热回流提取3次，h/次。过滤，减压回收乙醇、浓缩，得淡黄褐色浸膏。重复实验5次。.微波提取将500gYLS饮片粉碎成mm粒径，提取溶剂为60%乙醇，料液比为1∶8，提取温度.冷浸提取将500gYLS饮片粉碎成mm粒径，以石油醚：醋酸乙酯＝5∶5混和溶剂冷浸过夜提取，料液比为1∶8，连续提取5次，过滤，合并所有滤液，减压回收溶剂、浓缩，得淡黄褐色浸膏。重复实验5次。.2YLS总黄酮的分离3种方法提取所得的浸膏均

5、按下法分离得到总黄酮。将浸膏加适量蒸馏水混悬，500课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果r/min离心，倾去上清液，沉淀物加适量80%乙醇溶解，过滤除去沉淀，滤液加入适量石油醚，振摇30min，室温静置1h，除去石油醚萃取液，所得乙醇液浓缩至小体积，上AB-8大孔树脂柱(40mm×800mm)，用2倍量蒸馏水洗涤树脂柱，收集流出液和水洗液，再用95%乙醇洗脱，流

6、速为50～60滴·min-1。收集洗脱液并减压回收乙醇，浓缩物在60℃减压恒温干燥，干燥物用少量甲醇使之刚好完全溶解，室温放置2h，有晶体析出，过滤，重结晶3次，得到黄色针状结晶。.3YLS总黄酮的鉴别“”所得黄色针状结晶以浓氨水反应、三氯化铝反应、乙酸镁反应、盐酸－镁粉反应进行定性，均显阳性结果，证实所提取物质确为黄酮类。.4YLS总黄酮的测定精密称取3种方法提取的YLS总黄酮约10mg，分别以甲醇超声溶解，配成1mg·ml-1溶液，按照本室方法［3］，以芦丁为对照品，线形回归方程为：A=-+，于波长27nm处测定YLS黄酮的吸光度，带入回归方程，计算各组黄酮含量，

7、依据公式：黄酮提取率(%)＝黄酮含量/LYS饮片重量×100%计算3种提取方法的得率。.5统计分析总黄酮得率以±s表示，采用统计软件进行方差分析、配对样本均数比较的t检验。　3结果.1YLS总黄酮的分离结果结果见表1。表1YLS总黄酮得量(略)课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果　　　种方法YLS总黄酮提取率比较结果见表2。表2YLS总黄酮提取