抗丙型肝炎病毒第一高变区抗体捕获hcv病毒的实验研究_1

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果抗丙型肝炎病毒第一高变区抗体捕获HCV病毒的实验研究【摘要】目的采用抗丙型肝炎病毒第一高变区抗体，建立病毒捕获实验。方法重组表达HVR1嵌合抗原，免疫家兔，制备抗HVR1抗体，与20例患者阳性血清反应，通过HCVRT-PCR检测捕获结果。结果在30例样品中有13例完全捕获，16例部分捕获，仅1例未捕获。结论抗HVR1多抗可高交叉捕获HCV病毒。　　【关键词】肝炎病毒丙型；互补决定区抗体；聚合酶链反应　　Studiesonthea

2、ntibodiesagainsthypervariable1(HVR1)ofhepatitisCvirus(HCV)capturevirus　　　【Abstract】ObjectiveAsetoftestcaptureviruswasformulated.Usingantibodiesagainsthypervariable1(HVR1)ofhepatitisCvirus(HCV).MethodsRecombinantexpressionantigensofchimericHVR1,thepreparationofantibodiesagainstHVR1by

3、immuno-rabbit,with0casespatientsofHCVinfection课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果capturetest，theresultsweredetectedbyHCVRT-PCR.ResultsIn0casesofHCVinfectioncancapturevirusof13casescompletely,1cas

4、escapturepartly,only1casecannotcapture.ConclusionsTheantibodiesagainsthypervariable1(HVR1)ofhepatitisCvirus(HCV)canbroadlycapturevirusofHCV.　　【Keywords】hepatitisCvirus;complementaritydeterminingregionsantibody;polymerasechainreaction　　丙型肝炎是由丙型肝炎病毒感染引起的世界性传染病。研究表明，约70％～85%的HCV感染将发展为慢

5、性肝炎，其中部分最终将发展成为肝硬化和肝细胞癌，是极为严重的世界公共卫生问题。而目前仍没有有效的治疗和预防的方法，问题在于HCV变异大，而中和性表位所在的HVR1区变异更大，变异引起的免疫逃逸，要获得有效的免疫几乎不可能。但最近研究表明，HVR1虽然高变，但仍有一定规律课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果性，存在着一定的免疫交叉反应性，又为这方面研究带来

6、一线曙光。于是就出现了有关高交叉反应性HVR1的研究，也取得了可喜的结果。Zibert［1］等证明HVR1-Ab能有效捕获同株病毒粒子，Zhou［2］等证明HVR1-Ab能阻止同株病毒吸附于培养细胞上。本研究用克隆表达的交叉性HVR1作为免疫原，制备抗HVR1抗体，对20份病人血清进行了体外捕获病毒实验，获得了满意的结果。1材料与方法　　融合多片段HVR1抗原及抗HVR1体的制备［3］通过用生物信息学手段，从国内外已报道的123条HVR1序列，挑选了12条代表性HVR1序列，通过用酶联免疫对丙肝患者血清进行筛选，最终确定4条具有高交叉反应性的优势HVR1串联，

7、克隆表达获得高交叉反应的HVR1抗原。将纯化的HVR1融合蛋白，免疫雄性大耳白家兔，皮下注射1ml混合有完全弗氏佐剂1mgHVR1融合抗原，21、42天后用混合有不完全弗氏佐剂1mgHVR1再加强1次，51天后，耳静脉取血测效价，达到所需抗体效价要求后，颈总动脉取血。采用ELISA法对免疫动物血清的效价进行测试。　　血清样品0例临床确认的丙型肝炎患者血清。　　抗HVR1抗体捕获病毒试验　　常规捕获病毒试验HCVRNA阳性血清用PBS1：50稀释，4℃离心课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估

8、计。从本学科出发，应着重选对国民经济具