成体脂肪来源的flk1+间充质干细胞用于杜氏肌营养不良症治疗的可行性研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果成体脂肪来源的Flk1+间充质干细胞用于杜氏肌营养不良症治疗的可行性研究作者：刘艳宁　闫曦　孙昭　韩钦　赵春华【摘要】　　为了探讨成体脂肪来源的间充质干细胞移植治疗杜氏肌营养不良症的可行性，从成年GFP小鼠脂肪组织中分离得到间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSC)，用流式细胞术分析其细胞表型和细胞周期；在体外分别以成肌和成内皮诱导体系诱导ADMSC的定向分化，通过免疫荧光染色和RTPCR进行鉴定；经尾静脉移植ADMSC到CT

2、X肌肉损伤模型小鼠和mdx小鼠体内，通过RTPCR和免疫荧光染色检测供体细胞的分布和分化情况，并进行统计分析。结果表明：从GFP小鼠脂肪组织中分离得到的Flk1+MSC可以在体外分化为肌肉细胞和血管内皮细胞；细胞移植后，可在损伤肌肉部位检测到GFP阳性的肌纤维、血管内皮细胞和肌肉干细胞；mdx小鼠移植后肌膜上抗肌萎缩蛋白的表达部分恢复，骨骼肌中心核肌纤维比例也大大降低。结论：ADMSC是一种较为理想的供移植治疗DMD的干细胞，它不仅可以定向归巢到损伤的肌肉组织中，参与肌纤维重建，而且能改善组织供血，缓解DMD病征，同时部分供体细胞以干细胞形式存在，可以代替原来肌肉干细胞的功能，不

3、断修复损伤的肌肉组织。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果【关键词】间充质干细胞；分化；杜氏肌营养不良；干细胞移植MiceAdiposeDerivedFlk1+MesenchymalStemCellsCanAmeliorateDuchenne'sMusclularDystrophyinMdxMiceforTheirMultilineagePotentialAbstractDuc

4、hennemusculardystrophy(DMD)isacommonXlinkeddiseasecharacterizedbywidespreadmuscledamagethatinvariablyleadstoparalysisanddeath.Thereiscurrentlynotherapyforthisdisease.Thisstudywaspurposedtoinvestigatethefeasibilitytouseadultadiposederivedmesenchymalstemcells(ADMSCs)inthetherapyofDMD.TheFlk1+M

5、SCswereisolatedfromadiposetissueofadultGFPmice;thephenotypeandcellcycleofMSCswereanalyzedbyflowcytometry;theADMSCsweredirectionallydifferentiatedbymyoblastandendotheliablastinductionsysteminvitroandwereidentifiedbyimmumofluorecencestainingandRTPCR;theADMSCsweretransplantedintoCTXinjuredmicem

6、odelormdxmice(DMDanimalmodel)throughtailvEin;thedistributionanddifferentiationofADMSCsweredetectedbyimmunofluorescencestainingandRTPCR课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果respectively,andstatisticanalysiswasp

7、erformed.TheresultsshowedthattheFlk1+ADMSCscouldbeinducedtodifferentiateintomyoblastsandendothelialcellsinvitro.AftertransplantedintoCTXinjuredmicemodelormdxmice,GFPpositivecellscouldbedetectedindamagedmuscle,andthesedon