复方脑得生中黄酮类成分的高效液相色谱指纹图谱研究

《复方脑得生中黄酮类成分的高效液相色谱指纹图谱研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果复方脑得生中黄酮类成分的高效液相色谱指纹图谱研究作者：王光忠李桥宋恬张明樊文娟刘焱文【摘要】　　目的采用高效液相色谱法测定复方脑得生总黄酮的指纹图谱。方法采用D-101树脂分离纯化脑得生黄酮类成分。色谱柱为HypersilODS-C18；流动相为甲醇-乙腈-％磷酸水溶液，梯度洗脱；检测波长210nm；流速ml·min-1;柱温25℃；分析时间100min。结果指纹图谱中标示了23个共有峰，其峰面积之和大于总峰面积的90%，方

2、法精密度、稳定性、重复性均符合指纹图谱有关规定。利用指纹图谱相似度测试软件，测定11批脑得生总黄酮指纹图谱相似度结果均在～之间。结论实验结果为脑得生制剂的质量控制提供了依据。【关键词】复方脑得生黄酮类成分指纹图谱高效液相色谱法脑得生丸收载于《中国课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果药典》XX年版Ⅰ部，由三七、川芎、红花、葛根、山楂5味中药组成，具有活

3、血化瘀、通经活络的功效。用于瘀血阻络所致的眩晕、中风，症见肢体不用、言语不利及头晕目眩；脑动脉硬化、缺血性脑中风及脑出血后遗症见上述证候者［1］。临床应用广泛,疗效确切。但其制备方法为传统生产工艺，质量可控性差，药物稳定性难以控制，因而对临床疗效和患者服用有较大的影响，不能适应现代临床用药要求。研究表明，脑得生的主要活性部位为黄酮类成分、三七总皂苷和川芎油［2］，其中葛根、山楂、红花所含黄酮类成分具有多种药理作用［3～5］。为保证制剂质量和临床疗效，前期进行了制剂中药材的活性部位提取纯化的工艺研究。本研究以黄酮为主要分析对象，采用HPLC法对脑得生总黄酮提

4、取物进行了指纹图谱研究，为脑得生制剂的质量控制提供科学依据。1仪器与试药1100型Agilent高效液相色谱仪;BP211D电子天平。葛根素、羟基红花黄色素A对照品；试剂均为分析纯，甲醇，乙腈，磷酸；水为双蒸水。脑得生总黄酮提取物方法与结果.1色谱条件色谱柱HypersilODS-C18；流动相见表1；检测波长210nm；流速ml·min-1;柱温25℃。表1流动相梯度变化　　　对照品溶液的制备称取葛根素、羟基红花黄色素A对照品适量，加40％的乙醇配成浓度分别为，·ml-1的溶液，即得。.3脑得生总黄酮提取物的制备方法称取葛根、山楂和红花饮片共500g，7

5、0％乙醇回流提取3次。第1次用乙醇000课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果ml，回流提取h；第2次用乙醇4000ml，回流提取1h；第3次用乙醇000ml，回流提取1h。合并3次提取液，回收乙醇至无醇味，放置过夜，滤过，溶液稀释至每毫升含生药g，上D-101树脂柱，上样流速为BV·h-1，上样后先用5BV的蒸馏水冲洗，再用BV40％乙醇以BV·h-

6、1流速洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩至小体积，干燥，即得。共制得11批。.4供试品溶液的制备取脑得生总黄酮提取物约，精密称定，置50ml量瓶中，加40％的乙醇溶液超声溶解，定容至刻度，摇匀，即得。.5测定方法分别精密吸取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件操作，考察150min内供试品溶液的色谱分离情况，记录100min色谱图。结果见图1。.6方法学考察.精密度与稳定性实验取同一供试品溶液，分别于0，2，4，6，8，10h进样测定。测定结果表明，其共有峰相对保留时间和峰面积比值的RSD均小于3％，表明仪器的精密度良好，供试品溶液在10h内基本

7、稳定。.重复性实验精密称取7号样品6份，按上述供试品溶液的制备方法操作，进行测定，结果表明，各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值的RSD分别为％～％，％～％，符合指纹图谱的要求。.7指纹图谱及其技术参数课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果.共有指纹峰的标定根据11个批次提取物的检测结果，比较其色谱图。结果见图2。以相对保留时间标定其共有峰共23个，

8、以8号峰为参照峰，测定各共有峰相对保留时间和相对峰面积的比值，其R