几种中药单体抑制非小细胞肺癌增殖的实验研究

《几种中药单体抑制非小细胞肺癌增殖的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果几种中药单体抑制非小细胞肺癌增殖的实验研究作者：李妍，鞠晓红，任旷，李强，钟越【摘要】目的分析4种不同中药单体对非小细胞肺癌SPCA-1的生长抑制作用，为其临床应用提供实验依据。方法采用WST-1还原法分析不同浓度斑蝥素(，，10，20mg/ml)、去甲基斑蝥素(，，10，20mg/ml)、β-榄香烯(5，10，20，40mg/ml)和大黄素(10，20，40，80mg/ml)对SPCA-1细胞生长增殖的影响。结果β-榄香烯、斑蝥素、去甲斑蝥

2、素和大黄素均能抑制非小细胞肺癌增殖，且呈剂量依赖性，其中去甲斑蝥素的抗肿瘤活性最强，IC50为(±)mg/L。结论4种中药单体成分均能抑制肿瘤细胞SPCA-1的生长增殖，其中显著导致细胞生长抑制的是去甲基斑蝥素和斑蝥素。【关键词】肿瘤;中药;斑蝥素;β-榄香烯;大黄素;去甲基斑蝥素肺癌是常见的恶性肿瘤,其发病率、病死率在我国居前列，其中非小细胞肺癌的预后比较差。尽管现在的治疗课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究

3、生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果不断取得进展，生存率提高得还是很少[1]。寻找有效的抗癌药物成为肿瘤治疗领域的重要研究内容。中医药在肿瘤治疗中的应用日益受到关注。随着中药有效组分分离、纯化和结构修饰技术的进步，从中药中寻找高效、低毒的抗癌成分已经成为新药开发的重要途径。筛选肺癌细胞敏感的中药单体成分，将有助于推动中药在肺癌治疗中的应用，改进肺癌的治疗效果。本实验分析了4种不同的中药单体对非小细胞肺癌SPCA-1的生长抑制作用，以期为临床治疗非小细胞肺癌提供实验依据。　1材料与方法材料肺癌细胞株SPCA-1购自美国典型生物收藏中心(Americantypecult

4、urecollection，ATCC)。RPMI-1640培养液购自Sigma公司，小牛血清购自黄岩四季青生物试剂有限公司。斑蝥素和去甲基斑蝥素购自大连市医药科学研究所，β-榄香烯购自大连金港制药厂，大黄素购自复旦大学药学院天然药物研究所。WST-1细胞增殖检测试剂盒购自江苏碧云天生物技术公司。1.细胞培养SPCA-1细胞用含10%小牛血清的RPMI1640培养液，在37℃，5%CO2，饱和湿度的条件下连续传代培养，d更换1次培养液，实验时取对数生长期细胞。1.细胞增殖检测取对数生长期细胞，用%胰酶和%EDTA消化，1000r/min离心min收集细胞，调细胞密度为2×10

5、4/ml，接种于96孔板，100μl/孔。待细胞贴壁生长后，分别加入β-榄香烯、斑蝥素、去甲斑蝥素和大黄素4种中药成分至终浓度，液体总量200μl/孔，每组做4复孔，为实验组(T)。另外设置不加药物的对照组(C)和不加WST-1溶液的空白对照组(B)。继续培养7h，参照课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果WST-1试剂盒说明，检测4种中药单体对细胞增殖抑制的作用。简言

6、之：除空白对照孔外，每孔加入WST-1溶液20ml，在37℃培养h后，酶联检测仪检测450nm的吸光度值(A450)。按下列公式计算细胞增殖抑制率(InhibitionRate)，并以3次独立生物学实验的平均值表示最终实验结果。绘制药物浓度-细胞生长曲线，计算抑制50%细胞生长的药物浓度(inhibitoryconcentration0%,IC50)。细胞增殖抑制率(%)=[1-(A450T-A450B)/(A450C-A450B)]×100%1.形态学观察对数生长期细胞分别加入不同浓度β-榄香烯、斑蝥素、去甲斑蝥素和大黄素继续培养7h后，收集细胞，光镜下观察、拍照。　结果

7、.1种药物对细胞的抑制作用去甲斑蝥素、斑蝥素、β-榄香烯和大黄素对SPCA-1细胞的抑制作用见图1。去甲斑蝥素，斑蝥素，β-榄香烯和大黄素均能抑制SPCA-1细胞增殖，并呈剂量依赖性，其中去甲斑蝥素的抗肿瘤作用最显著，IC50为±/L,其次为斑蝥素，IC50为(±)mg/L,β-榄香烯和大黄素的IC50分别为(±)mg/L和(±)mg/L。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。