分析谷胱甘肽

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果分析谷胱甘肽作者：赵利娜，陶佳，赵运胜，廖飞【关键词】积分法；动力学酶法分析；还原型谷胱甘肽；谷胱甘肽　　摘要：目的以谷胱甘肽S转硫酶(GST)为模型，探讨有产物抑制时用积分法分析酶反应过程测定底物量的可靠性。方法从猪肝制备GST。1氯2,4二硝基苯(CDNB)终浓度为/L，监测GST催化还原型谷胱甘肽(GSH)与CDNB结合产物在340nm吸收变化。用积分法预测反应终点的产物吸收。结果优化产物抑制常数可使此积分法所得反应终点产物吸收对剩余底物变化不敏感。

2、此积分法测定GSH对常见干扰有抗性。此法测定大鼠肝匀浆中外加GSH回收率大于98%，线性响应上限接近90μmol/L，下限接近μmol/L，所得大鼠肝GSH含量与文献报道一致。结论有产物抑制时用积分法也可定量底物；用此积分法进行动力学酶法分析具有一定普遍性，而且有明显优势。关键词：积分法；动力学酶法分析；还原型谷胱甘肽；谷胱甘肽S转硫酶；1氯2,4二硝基苯QuantificationofreducedglutathionebyanalyzingglutathineStransferasereactionprocesstakingintoaccountofproductinhibition

3、)ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatethereliability课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果oftheintegratedmethodforkineticassayofsubstrateinthepresenceofproductinhibitionusingglutathioneStransferase(GST)asmodel.MethodsP

4、urifiedGSTfrompigliverwasusedtocatalyzetheconjugationofreducedglutathione(GSH)to1chloro2,4dinitrobenzene(CDNB)(finalconcentrationat/L),andreactioncurvewasmonitoredbyproductabsorbanceat40nm.Maximalproductabsorbanceafterthecompletionofreactionwaspredictedbytheintegratedmethod.ResultsTheoptimization

5、ofproductinhibitionconstantconferredtoresistancetothevariationofresidualsubstrateconcentrationontheestimationofmaximalproductabsorbance.Thisintegratedmethodforkineticsubstrateassaywasalsoresistanttocommonsourceoferrors.TherecoveryforextraGSHinratliverhomogenatewasabove8%withlinearresponserangedμm

6、ol/Lto0μmol/L.TheconcentrationofGSHinratliverwasconsistenttopreviousreports.ConclusionTheintegratedmethodisvalidforkineticassayofsubstratewhenthereisproductinhibition,anditexhibitssomeuniversalityasakineticmethodforenzymaticanalysiswithobvious课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估

7、计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果advantages.KEYWORDS:integratedmethod;kineticenzymaticanalysis;reducedglutathione;glutathioneStransferase;1chloro2,4dinitrobenzene还原型谷胱甘肽(glutathione,