关于泡盛曲霉生成酸性蛋白酶调节问题的研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果关于泡盛曲霉生成酸性蛋白酶调节问题的研究对于微生物细胞所分泌的酶的形成物的调节，可按负反馈原理进行。曾发现在培养基中则含有这些酶类，如黄曲霉(Aspergillusoryzae)的a一淀粉酶。随后又确定，用同样的方法，又发现在酵母机体中对所分泌的日一果糖普酶(转化酶)的形成物具有调节作用。根据这种调节机理可以阐明许多特性，其结论是:这种调节原理应进一步加以扩展。本文提供这样的结果，即可断定，当培养基中含有蛋白酶时，对A

2、spergillusawan:。ri所分泌的蛋白酶的形成物，存在着调节作用。关于这点早已有所报导。试验是用AspergilluSawamori78一2的培养物进行的。这一菌株是由卡诺凡洛夫(。:a二oB)和沙霍夫(山。xoB)分离而得的。所产生的蛋白酶(np0Tea3a，阮酶)，实际上是一种酸性蛋白酶，其能大量地产生这种酶。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必

3、须有创新性的成果霉菌培养在1升中含有如下成分的培养基质中，其配方为:磷酸二氢钾一5克，硫酸镁一20毫克，硫酸锌一20毫克，硫酸铁一20毫克，黑麦粉提出液(在200毫升水中加入20毫克麦粉，在温度+2“c的条件下经17小时，然后经离心分离而制得)，PHS。6，应当指出:在培养基的条件中，特别重要的是蛋白质的含量，为此，在研究工作中特别要选择这样的方法，即使其保证在无抑制的条件下大量地形成蛋白酶，而蛋白酶则由蛋白分解物而合成。菌种培养在麦芽汁一琼脂培养基上，系用胞子悬浮液进行接种。培养物放置在摇床上(温度26OC)，在通气的条件下培养一昼夜。对培养液和菌

4、丝体中的蛋白酶活性进行了测定。后者与玻璃粉一道研磨2分钟，并在室温下浸泡一小时。测定活性系按研究诱发变异方面的M.阿恩沙()的方法、沙霍夫和卡诺凡洛夫的方法而进行的。其利用溶解在的盐酸甘油缓冲液中的公牛血红蛋白(BH:二达FeMoT二。6oH)而作为培养基质的。反应过的混合物。其在适当的基质浓度和控制地加入两倍体积的5%三氯乙酸的条件下，按初速状态进行反应。活性是按1克菌丝体中所形成的酪氨酸(Topo3oH)的数量(按毫克计)而表示的。在上述条件下，为了弄清楚当培养基中存在过量的酶制剂时对细胞分泌酶形成物的压抑作用，可在接种前将从同类试物中分离出来的

5、酶制剂加入培养基中，这样使其建立具有一定浓度蛋白酶的条件。作者曾由培养在含有黑麦粉(2%)培养基中的Aspergillusawamori78一2培养液中制取了酸性蛋白酶制剂。试验的程序也正如以前所叙述过的那样，提出了三个方案:l)加入酶制剂的原始培养基;)在这种培养基上所得的霉菌培养物;)未加入酶制剂的霉菌培养物。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性

6、的成果为了探索调节因子的作用界限，则将酶制剂按不同浓度加入培养基中。酶的水溶液则通过细菌过滤器进行消毒。在试验过程中，向培养基中所加的酶活性和培养基的PH是不变的。在不同的试验方案中培养物的生长情况，均未发现异常现象。在表中列出了典型试验的结果。由表可见，培养基中的酶对于酶分泌物的形成显示着一定的压抑作用。培养基中蛋白酶浓度愈高，那末，细胞形成物在更大程度上处于受压抑的地位。压抑仅属于酶的分泌部份。在某种条件下，而细胞中蛋白酶活性的水平甚至还会提高一些。但是，这一提高远不能补偿酶分泌部份因活性的受压抑所遭的损害。!二述现象，即复现了在研究其它试验物时

7、早就揭示的规律性。　　在以前的研究中已获得大量数据，研究所得的效应可视为调节原理。并确定，培养基中所具有的活性酶就是调节因子。依加洛夫()及其同事们对具有水解能力的色氏菌(Serratiamarcesce。)所分泌的蛋白酶的详尽的调节机理进行了深入探讨。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果从所进行的一系列对照试验中，其使我们深信，在上述的因子中

8、，我们找到了在培养基中含有调节因子对培养物分泌酶的调节作用的新例证。而没有可仿造的这种规律性的任何的其它现象