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时间:2018-12-28
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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划溶血素效价的测定实验报告 [键入公司名称] 免疫学实验教案 研究生教育实习 潘熙萍(YXX0201) XX/1/14 [在此处键入文档的摘要。摘要通常是对文档内容的简短总结。在此处键入文档的摘要。摘要通常是对文档内容的简短总结。] 实验一免疫血清的制备 一、实验目的 熟悉免疫血清的制备过程; 了解动物实验的基本知识。 二、实验原理 将抗原物质经适当途径,按照预先制定的免疫方案免疫动物,经过一定时间,可刺激机体产
2、生特异抗体并释放入血液,当血中抗体达到一定效价时采血,分离血清,即为特异性免疫血清。因抗原具有多种表位,可激活多个克隆的B细胞活化产生抗体,因此,这种免疫血清又称为多克隆抗体。本实验以绵羊红细胞作为免疫原,以家兔为免疫动物,制备兔抗养红细胞免疫血清目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 三、器材和材料 1.动物健康成年家兔,雄性,体重2-3kg
3、;健康成年绵羊。 2.试剂生理盐水、碘酒、75%酒精。 3.器材剪刀、镊子、无菌注射器、量筒、无菌毛细滴管、无菌试管、离心管、三角烧瓶、动物固定架、手术器械一套、塑料放血管等。 四、实验步骤 1.抗原制备 用碘酒和75%消毒绵羊皮肤,抽取颈静脉血液,注入含有等量阿氏液的三角烧瓶内,混匀。阿氏液既有抗凝作用,又适于储存SRBC。分装后置4℃冰箱内,可使用3周。 无菌取上述绵羊血于离心管中,用无菌生理盐水洗涤红细胞,XXr/min,离心5min,吸弃上清液和白细胞层,再用无菌生理盐水与SRBC混匀,XXr/min,离心5min,重复3次
4、。最后一次离心10min,以使血细胞沉积于管底,弃去上清液。 根据红细胞积压,用生理盐水配成20%SRBC悬液。 2.免疫动物 全班分为4组,每组选择健康雄性兔1只,用于免疫。 用全血和SRBC悬液按下述方案免疫兔子。 试血目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 末次注射后第7天,耳静脉采血1ml,分离血清,用试管凝集试验滴定效价。
5、3、分离血清 颈动脉放血并收集于无菌三角烧瓶中凝固后4℃冰箱过夜,分离上层血清。然后2500r/min离心10min,收集收集上层血清。 收集的血清经鉴定纯化后,小量分装,-20℃冻存。 五、实验结果 收获的血清应无菌,且无溶血现象。兔抗SRBC免疫血清的溶血效价应高于1:XX;兔抗人IgG免疫血清的效价应高于1:16。 六、注意事项 抗原制备、免疫动物及采集血清等过程应注意菌操作; 免疫的途径、次数、间隔时间因抗原性状不同而异,应合理设计免疫方案,并更具具体情况加以调整; 再次注射免疫原时,要防治过敏反应发生。 实验二免疫细
6、胞的形态观察 一、实验目的 掌握微量采血及血涂片的制作方法; 学习使用光学显微镜观察免疫细胞 二、实验原理目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 血涂片是临床化验中最常规的技术,也是血液学研究中的最基本技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本,经瑞氏染液染色后,不同免疫细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。根据细胞中颗粒的颜色、大小及多少,再结合
7、细胞的大小及细胞核的形态,就可以将免疫细胞进行分类计数。 三、器材和材料 器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片等试剂:瑞氏染液,瑞特氏染料克溶于60ml甲醇中,过滤。贮褐色瓶中备用。 四、实验步骤 1.采血 动物采血时先将耳部剪毛,酒精消毒后,刺破动物耳部皮肤,挤去第一滴血不要。 2.涂片 挤出第二滴血置于载玻片的一端,再取另一张边缘光滑的载玻片,斜置于血涂片的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线状,两玻片的角度以30~40O为宜,轻轻将载玻片向前推进,即涂成血液薄膜,推进时速度要一致,否则
8、血膜成波浪形,厚薄不匀。 3.染色 待涂片在空气中完全干燥后,滴加数滴瑞氏染液盖满血膜为止,染色1~3min。然后滴加等量的缓冲液或蒸馏水冲去染液
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