植物组织离体培养

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1、植物组织离体培养-组织培养实验室的建立(2)摘要：组织培养实验室实际上就是从组培材料进到合格商品苗出的生产线，实验室的各个分区单元就是生产车间，各个分区单元就是按组培体系建立的要求顺序排列的。实验室是一个无菌系统，是一个光、温、湿、气可控系统，这都是建立组培体系的必要保证系统。无论实验室的性质和规模如何，实验室设置的基本原则是：科学、节能、减排、低耗、高效、经济和实用。组织培养实验室布局的总体要求是：便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察、适合于生产技术路线。关键词：基本实验室、辅助实验室、温室、组培室通用仪器设备、组培室药品试剂、学校

2、组培室、家庭组培室、企业组培室、常用设备仪器组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方，最好在常年主风向的上风方向，尽量减少污染。规模化生产的组织培养实验室应建在交通方便的地方，便于培养物料和产品的运送。实验室的建设均需考虑两个方面的问题：一是所从事的实验的性质，是生产性的还是研究性的，是基本层次的还是较高层次的；二是实验室的规模，规模主要取决于经费和实验性质。设计组织培养实验室时，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化

3、生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。在设计时，应按组织培养程序来没计，避免环节倒排，引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。组织培养实验室实际上就是从组培材料进到合格商品苗出的生产线，实验室的各个分区单元就是生产车间，各个分区单元就是按组培体系建立的要求顺序排列的。实验室是一个无菌系统，是一个光、温、湿、气可控系统，这都是建立组培体系的必要保证系统。无论实验室的性质和规模如何，实验室设置的基本原则是：科学、节能、

4、减排、低耗、高效、经济和实用。组织培养实验室布局的总体要求是：便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察、适合于生产技术路线。一个组织培养实验室必须满足3个基本的需要：实验准备（培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌）、无菌操作和控制培养。此外，还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施，使实验室更加完善。1.标准组织培养室包括基本实验室和辅助实验室：1.1.基本实验室：基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间和温室，是组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产，基本实验室用房的总面积和间数要按按

5、实际需要设置。1.1.1.准备室（化学实验室）用于进行一切与组织培养有关的准备工作：各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。一般准备室面积在20㎡以上。宽敞明亮、便于放置多个实验台和相关设备，方便多人同时工作；通风条件好，便于气体交换；地面应便于清洁、防滑。若属研究性质实验室，应将准备室分隔为药品贮藏室、培养基配制、洗涤室和灭菌室等，功能明确，便于管理。属规模化生产的准备室一般为大的通间，使试验操作的各个环节在同一房间内按程序完成。准备试验的过程在同一空间进行，便于程序化操作与

6、管理，减少各环节间的衔接时间，从而提高工作效率。此外还便于培养基配制、分装和灭菌的自动化操作程序设计，从而减少规模化生产的人工劳动，更便于无菌条件的控制和标准化操作体系的建立。准备室应具备水、电、煤气灶或电磁炉、实验台、药品柜、水池、仪器、药品、防尘橱或架（放置培养容器）、冰箱、天平、离子交换器；蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器等。1.1.2.灭菌、洗涤室用于完成培养基的灭菌和各种器具的洗涤、干燥、保存等。洗涤灭菌室根据工作量的大小决定其大小，一般面积控制在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽，用来清洗玻璃器皿。

7、中央实验台还应配置2个水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大，可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸，专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿，地面应耐湿并排水良好。本室应配备高压灭菌锅、水池、落水架、中央实验台、超声波清洗器、干燥灭菌器（如烘箱）、推车等。1.1.3.缓冲间进入无菌室前的一个缓冲场地，减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋，戴上口罩，才能进入无菌室和培养室。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间可建在无菌操作室外，应保持清洁无菌；备有鞋架和衣帽挂钩，并有清洁的实验用拖鞋

8、、已灭菌过的工作服；墙顶用1-2盏紫外灯定时照射，对衣物进行灭菌。缓冲间的门应该与接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间应备1-2盏紫外灯、水槽、实验台、鞋帽架