基于纳米材料的肿瘤活体荧光成像以及光动力学治疗研究

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划基于纳米材料的肿瘤活体荧光成像以及光动力学治疗研究　　活体动物体内生物发光和荧光成像技术　　基础原理与应用简介　　文章来自中国生物器材网　　文章目录：　　一、活体生物发光成像技术　　二、活体动物荧光成像技术　　三、生物发光成像与荧光成像的比较　　四、活体动物可见光成像仪器原理与操作流程目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障

2、停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　活体动物体内成像技术是指应用影像学方法，对活体状态下的生物过程进行组织、细胞和分子水平的定性和定量研究的技术。活体动物体内成像技术主要分为可见光成像(opticalimaging)、核素成像、核磁共振成像和超声成像、计算机断层摄影或Cyt及dyes等荧光染料进行标记，利用荧光蛋白或染料产生的荧光就可以形成体内的荧光光源。前者是动物体内的自发光，不需要激发光源，可通过高度灵敏的CCD直接捕捉光信号，而后者则需要外界激发光源的激发才可以捕捉发光信号。传统的动物实验方法

3、需要在不同的时间点宰杀实验动物以获得数据,得到多个时间点的实验结果。相比之下，体内可见光成像技术通过对同一组实验对象在不同时间点进行记录，跟踪同一观察目标的移动及变化，所得的数据也更加真实可信。另外,这一技术由于不涉及放射性物质，具有操作简单，所得结果直观，灵敏度高等特点,在刚刚发展起来的几年时间内，已广泛应用于生命科学、医学研究及药物开发等方面。　　一、活体生物发光成像技术　　技术原理　　1.标记原理　　哺乳动物生物发光，一般是将Fireflyluciferase基因即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶，培养出能稳定表达

4、荧光素酶的细胞株，当细胞分裂、转移、分化时,荧光素酶也会得到持续稳定的表达。基因、细胞和活体动物都可被荧光素酶基因标记。将标记好的细胞接种到实验动物体内后，当外源给予其底物荧光素(luciferin)，即可在几分钟内产生发光现象。这种酶在ATP，氧存在的条件下，催化荧光素的氧化反应才可以发光，因此只有在活细胞内才会产生发光现象，并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利

5、开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　除FireflyLuciferase外，有时也会用到RenillaLuciferase。二者的底物不一样，前者的底物是荧光素，后者的底物是coelentarizine。二者的发光波长不一样，前者所发的光波长在540~600nm，后者所发的光波长在460~540nm左右。前者所发的光更容易透过组织，后者在体内的代谢比前者快，而且特异性没有前者好，所以大部分活体实验使用FireflyLuciferase作为报告基因，如果需要双标记，也可采用后者作为备选方案。　　荧光素酶的发光是生物发光，不需要激

6、发光，但需要底物荧光素。荧光素在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应，生成氧化荧光素(oxyluciferin)，并产生发光现象。　　对于细菌标记，一般利用发光酶基因操纵子luxABCDE或luxCDABE，其由控制的编码荧光素酶的基因和编码荧光素酶底物合成酶的基因组成。利用这种办法进行标记的细菌会持续发光，不需要外源性底物。但是一般细菌标记需要转座子的帮助把外源基因插入到细菌染色体内稳定表达。　　2.底物荧光素的特点　　荧光素由于诸多优点得到广大科研人员的青睐，主要特点如下：　　(1)荧光素不会影响动物的正常生理功能。　　(2)荧光素是28

7、0道尔顿的小分子，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透细胞膜和血脑屏障。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　(3)荧光素在体内扩散速度快，可通过腹腔注射或尾部静脉注射进入动物体内。腹腔注射扩散较慢，持续发光长。荧光素腹腔注射老鼠后约1min后表达荧光素酶的细胞开始发光，10min后强度达到稳定的最高点，在最高点持续约20~30min后开始衰减，约3

8、h后荧光素排除，发光全部消失，最佳检测时间是在注射后15~35min之间；若进行荧光素静脉注射，扩散快，但发光持续时间很短