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《乙烯四胺对c-myc启动子的调节作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、三乙烯四胺对c-MYC启动子的调节作用邓小红刘建辉*郑旭煦陈刚郭丽霞(重庆工商大学药物化学与化学生物学研究中心，重庆，400067)摘要目的探讨三乙烯四胺(triethylenetetramine,TETA)对c-MYC启动子的调节作用。方法构建c-MYC启动子的荧光报告质粒及其突变体，经过序列测定后，转染HEK293细胞24h后，以终浓度为0mmol/L,0.1mmol/L,1.0mmol/L,10mmol/L,100mmol/L的TETA处理，测定其启动子的转录活性，计算TETA对其转录活性
2、抑制率。结果成功构建c-MYC启动子荧光报告质粒PGL3-Basic/c-MYCNHEIII1promoter及其突变体pGL3-Basci/c-MYCNHEIII1promotermutant。将二者分别转染细胞后发现，TETA可以剂量依赖的抑制c-MYC启动子的转录活性，而对突变体的转录活性抑制作用明显下降。结论TETA能通过c-MYC启动子上的超敏元件对其转录活性具有负调节作用。关键词：TETA；c-MYC启动子；G四链体；转录活性基金项目：国家自然基金(30600813,30701020
3、)、教育部新世纪优秀人才计划（NCET-07-0913）以及重庆市科委重点基础项目（CSTC,2005BA5023）的资助。作者简介:邓小红，女，在读博士 *通讯作者:刘建辉，男，教授，硕士研究生导师 Tel:(023)62769652 Email:jhliu@ctbu.edu.cnTETAregulatesthetranscriptionofc-MYCpromoterbyenhancingthestabilityofG-quadruplexDENGXiao-hong,LIUJian-hui
4、*,ZHENGXu-xu,CHENGang,GUOLi-xia(ResearchCenterofPharmaceuticalChemistry&ChemicalBiology,ChongqingTechnologyandBusinessUniversity,Chongqing,400067,China)ABSTRACT:OBJECTIVETostudytheeffectoftriethylenetetramine(TETA)onthetranscriptionofc-MYCpromoter.ME
5、THODSAfterthewildandmutantreportergeneplasmidscontainingthec-MYCNHEIII1sequencewereconstructed,thetwoplasmidweretransfectedintoHEK293cells.Thetransfectedcellswerereplatedinto96wellsplate,andtreatedwithdifferentconcentrationsofTETA(0.0mmol/L,0.1mmol/L
6、,1mmol/L,10mmol/L,100mmol/L)forabout6-8h,theluciferaseactivitywasdeterminedwithitssubstrateBrightGlo.TheinhibitingrateofTETAonthereportergenewerecalculatedbytheluciferaseactivity.RESULTSTheluciferasereportgeneplasmidsincludingpGL3-Basic/c-MYCNHEIII1p
7、romoteranditsmutantwereconstructedsuccessfully.AndTETAcouldinhibitthetranscriptionactivityofwildreportergeneinadose-dependentmanner,butforthemutatedgene,theinhibitingratewasdecreasedsignificantly.CONCLUSIONTTETAhasnegativeregulatoryeffectonc-MYCpromo
8、terthroughnucleasehypersensitiveelementIII1.Keywords:Triethylenetetramine；c-MYCpromoter；G-quadruplex；transcriptionc-MYC是一种重要的转录因子，参与多种生理功能，如在G1/S的过渡、G2/M的转化中都有作用，与细胞的生长、增殖、分化密切相关。它同时也是一种重要的原癌基因，位于肿瘤发生、发展的多种信号通路的关键交汇点，其蛋白的表达失调与肿瘤的发生、发展密切相关[1,2]，过量表达将直
