生物工程专业毕业设计-金龟子绿僵菌对熊果酸转化条件的研究

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1、本科毕业论文金龟子绿僵菌对熊果酸转化条件的研究邱益池200830620120指导教师肖苏尧讲师学院名称食品学院专业名称生物工程论文提交日期2012年5月7日论文答辩日期2012年5月21日摘要熊果酸(UrsolicAcid)是存在于天然植物中的一种三萜类化合物,分子式为C30H48O3。具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应,熊果酸还具有明显的抗氧化功能,因而被广泛地用作医药和化妆品原料。但是熊果酸生物利用度低,制剂种类单一,限制了其生物活性的开发。修饰改造其分子结构,从而提高生物利用度,达到保护环境、创制新药的目的。本研究旨在利用金

2、龟子绿僵菌对熊果酸进行生物转化,在已知金龟子绿僵菌可对熊果酸进行生物转化的情况下,通过优化培养基,以及将转化温度、pH、摇床速度等转化条件作为主要因素变量进行综合考察,对其转化条件进行优化。经优化培养基组分以及转化工艺条件,可得优化液体培养基PDA(g/L):土豆200、葡萄糖20、玉米浆20、酵母膏3、K2HPO41.5,并可确定最佳转化条件,温度、pH、转速最佳条件分别为28℃、6.5、160rpm。首先,建立了熊果酸的检测方法,确定TLC定性分析法的展开剂为环己烷:乙酸乙酯:乙酸=4:1.5:2滴,显色剂为10%的硫酸乙醇溶液;通过对流动相比例的调整,确

3、定HPLC检测法的流动相为乙腈:水的体积比为85:15,等梯度洗脱,检测波长为210nm,流速是1.0mL/min,温度为32℃。利用金龟子绿僵菌(购自上海中科院研究所)对熊果酸进行生物转化,通过以熊果酸转化率为指标,逐一设定最优培养基组合、适宜斜面培养时间、最适接种量、最适转化反应时间、最适转化工艺等最适条件,特别对培养基组合与转化工艺条件组合进行正交设计实验,得到最优组合。关键词:熊果酸金龟子绿僵菌生物转化TransformationConditionsofUrsolicAcidbyMetarhiziumAnisoplaeQiuYichi(Collegeo

4、fFoodScience,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,China)Abstract:Ursolicacidisapentacyclictriterpeneexistinthenaturalplants.ItsmolecularformulaisC30H48O3.Ithasmanybioactivities,includingsedation,anti-inflammatoryactivity,anti-bacterialactivity,anti-virusactivity,diabetes

5、,pepticulcer,reducebloodsugar.Itisalsowidelyusedinthematerialofmedicineandcosmeticsbecauseoftheobviousantioxidantfunction.Sinceursolicacidhaslimitedactivesitesforchemicalmodification,it’snoteasytoobtainlargenumberofitsderivativesforeffectivestructure–activityrelationship(SAR)study.T

6、hisresearchstudiedthetransformationofUrsolicacidbysomemicroorganisminanattempttomodifyitsstructuresoastoimprovethebioavailability,protecttheenvironmentandcreatethenewmedicine.ThisstudyaimstotakeadvantageofMetarhiziumanisopliasebiotransformationofursolicacid,incaseofknownMetarhiziuma

7、nisopliasewasabledtotransformursolicacid,bymodifyingmediumcomponents,andtakingconversionoftemperature,pH,wavespeedofShakertoacomprehensivestudyofconditionsasthemainvariable.Aftermodified,wegotoptimizedliquidmediumPDA(g/L):potatoes200,glucose20,cornsteepliquor,yeastextract,K2HPO41.5,

8、andgotthebestcondit

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