《还原糖滴定法》word版

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1、15.2.2.1    铜还原——直接滴定法15.2.2.2   姆松——华尔格法(高锰酸钾容量法)15.2.2.3   常量法——氰化盐碘量法15.2.2.4    夏费—索姆吉法——半微量法　15.2.2.1 铜还原——直接滴定法(Lane-Eynon’smethod)［1，2］Top15.2.2.1.1 方法原理样品中的水溶性糖可以用80℃温水浸提，但对含淀粉和菊糖高的样品则须用800mL·L-1-850mL·L-1酒精浸提，其中还原糖可使费林(Fehling)试剂还原生成Cu2O沉淀，而本身被氧化和降解成糖酸。费林试剂是由CuSO4溶液、NaOH和KNaC4H4O6溶液组

2、成。在碱性溶液中，酒石酸盐可与铜盐形成配离子而不致生成氢氧化铜沉淀。其反应如下：Cu2++2OH-+2(C4H4O6)2-→［Cu(C4H3O6)2］4-+2H2O在煮沸条件下，用还原糖待测液滴定一定量的费林试剂时，铜的酒石酸配离子被还原糖还原，产生红色Cu2O沉淀，还原糖则被氧化和降解，其反应示意式如下： 上述反应是铜还原法测糖的基本原理。滴定时是以亚甲基蓝为氧化还原指示剂，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，即达滴定终点。还原糖与费林试剂反应的完全程度与滴定时条件(如加热强度、温度、时间等)很有关系，故必须严格按照操作规程测定。指示剂也消耗

3、一定量还原糖，所以每次滴定时须按规定加入相同数量的亚甲基蓝。本法适宜于含糖量高的样品(15—50mL糖液中含糖50mg)。15.2.2.1.2 主要仪器高速组织捣碎机；电热恒温水浴锅；玻塞滴定管(附弯形尖管，见图15-1) 图15-1 弯形尖管规格及安装图1.玻塞滴定管 2.橡皮圈 3.橡皮管 4.弯形尖管(管径为5mm)15.2.2.1.3 试剂(1)Soxhlet修正的费林(Fehling)溶液：应用前立刻配制，通过下列费林试剂A和B溶液等体积混合而制得。①    费林试剂A：溶解CuSO4·5H2O34.639g于水中，移入500mL容量瓶中，用水定容。②    费林

4、试剂B：溶解酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)173g和NaOH50g于少量水中，洗入500mL容量瓶中，用水定容。(2)100g·L-1中性醋酸铅溶液：称100g醋酸铅［Pb(CH3COO)2·3H2O］(化学纯)溶于水中，过滤后稀释至1L。(3)Ba(OH)2饱和溶液：在100mL无CO2水中，加入固体Ba(OH)2·8H2O(化学纯)约6g，用玻棒搅拌，将烧杯盖好过夜，次日滤去未溶物，溶液装在细口瓶中备用。为了防止与空气中CO2接触，应装设碱石灰管及虹吸管。(4)Na2SO4饱和溶液：称Na2SO4·10H2O(化学纯)165g，溶于1L水中。(5)50g·L

5、-1硫酸锌溶液：称取ZnSO4·7H2O(化学纯)50g，加水溶解，并用水稀释至1L。(6)850mL·L-1及800mL·L-1乙醇(C2H5OH)溶液：取950mL·L-1乙醇(分析纯)85mL，加水稀释至95mL，即为850mL·L-1乙醇溶液。取950mL·L-1乙醇80mL，加水稀释至95mL，即为800mL·L-1乙醇溶液。(7)固体草酸钠(Na2C2O4)试剂(分析纯)。(8)10g·L-1亚甲基蓝水溶液：称亚甲基蓝1.00g溶于水中，加水稀释至100mL。(9)2mg·mL-1葡萄糖标准溶液：称取干燥的葡萄糖(优级纯)0.2000g用少量水溶解后，洗入100m

6、L容量瓶中用水定容。15.2.2.1.4 操作步骤(1)待测液制备①水提取法：清除新鲜水果、蔬菜样品外来污染的杂质，尽可能快地磨细或切碎，混匀，称取样品25.00g—50.00g(含糖约2.5g)，置高速组织捣碎机中，加适量水后捣碎(或置研钵中加少量纯石英砂共同研磨)，然后小心移入250mL容量瓶中，加水至约150mL；或风干已磨细的样品则可称取0.500—5.00g，洗入250mL容量瓶中，亦加水至约150mL。然后加入粉状CaCO30.5—1.5g中和样品中的酸度(防止浸提过程中蔗糖水解)，摇动1min，置于80℃水浴中保温浸提0.5h，其间摇动数次以利糖分浸提完全。冷却，滴

7、加100g·L-1中性醋酸铅溶液至产生白色絮状沉淀，充分摇动混合，静置15min，再滴加几滴中性醋酸铅溶液于上部清液中检查是否沉淀完全。如果还有沉淀形成，再摇动，静置，直至不产生白色絮状沉淀为止(约2—5mL)，用水稀释定容。用干滤纸过滤。加入足量草酸钠固体到滤液中，使铅沉淀完全，再用干滤纸过滤，再用固体草酸钠少许加到滤液中，检查铅是否沉淀完全。无铅的滤液待用。②乙醇提取法：称取剪碎、混匀的新鲜植株样品(含大量淀粉或菊糖的样品)25.00g或是干样称0.500—5.00g，放入4