《基因工程大题》word版

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1、2基因工程操作的基本步骤是什么？①施工材料的准备，即目的基因、载体、工具酶和受体细胞（宿主）的准备。用限制性内切酶分别将外源DNA和载体分子切开。（切）②目的基因与载体DNA的体外重组，形成重组DNA分子。（接）③把重组的DNA分子引入受体细胞，并建立起无性繁殖系。（转和扩④筛选出所需要的无性繁殖系，并保证外源基因在受体细胞中稳定遗传、正确表达。（检）3如何理解基因工程的两个特点？答：基因工程的两个基本特点是分子水平的操作和细胞水平的表达。分子水平的操作包括DNA分离、切割和连接（还有其他一些DNA的修饰等）。

2、由于体外重组DNA的最终目的是要改变生物的遗传性，所以分子水平的操作和细胞水平的表达是基因工程的两个最基本的特点。4基因克隆是如何使含有单个基因的DNA片段得到纯化的？答：大分子质量的DNA会含有许多特殊限制性内切核酸酶的限制位点，因此用一种限制酶处理一完整染色体或整个基因组会产生许多不同的DNA片段，每一个片段带有基因组的一个不同的基因或一个不同的小片段。当全部片段与用同种限制酶处理过的载体分子混合时（如图所示），每个片段将插入一个不同的载体分子(如一个质粒)。同样地，当用这些质粒转化宿主细胞时，每个宿主细胞

3、将只接收一个质粒DNA分子，而筛选出的含重组质粒的每个菌落实际上会含有某一特异的供体DNA片段的多个拷贝。一旦带有待研究的特定基因的克隆被确认了，此重组DNA分子可从宿主细胞中提取出来进行纯化。5比较遗传工程、基因工程和生物技术。答：遗传工程是遗传学和工程学相结合的一门技术科学。借用工程技术上的设计思想，在离体条件下，对生物细胞、细胞器、染色体或DNA分子进行按图施工的遗传操作，以求定向地改造生物的遗传性。遗传工程的概念有广义和狭义之分。狭义的遗传工程就是指基因工程。基因工程（geneengineering）又

4、称基因操作（genemanipulation）、重组DNA（recombinantDNA）。基因工程是以分子遗传学理论为基础，以分子生物学和微生物学的现代方法手段，将不同来源的基因(DNA分子)，按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性，获得新品种，生产新产品，或是研究基因的结构和功能。生物技术又称生物工艺学，生物工程学。是根据生物学、化学和工程学的原理进行工业规模的经营和开发微生物、动植物细胞及其亚细胞组分，进而利用生物体所具有的功能元件(如基因、蛋白质)等来提供商

5、品或社会服务的一门综合性科学技术。它包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程等。6说明SangerDNA测序法的原理。答：SangerDNA测序法建立在两个基本原理之上：①核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5’端向3’端聚合；②可延伸的引物必须能提供游离的3’羟基末端，双脱氧核苷酸由于缺少游离的3’羟基末端，因此会终止聚合反应的进行。如果分别用四种双脱氧核苷酸终止反应，则会获得四组长度不同的DNA片段。通过比较所有DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。11当两种限制性内切核酸酶的作用条件不同时，若要进行双酶切，

6、应采取什么措施?为什么?答：注意星号活性；先低盐，后高盐；先低温酶，后高温酶；并且可以直接在换酶前将第一种酶失活，再加第二种酶，否则，易产生星号活性，或使用通用缓冲液。12．何谓限制性物理图谱？答：限制性物理图谱即限制性内切核酸酶作图(restrictionmapping)。简单地说就是DNA分子中限制性内切核酸酶切割位点的定位，即DNA分子中各种不同限制性内切核酸酶的酶切位点的线性排列图。标明限制酶在DNA分子上的限制性位点的数目、限制性片段大小及其线性排列的顺序。13什么是细菌的限制—修饰系统(Restri

7、ctionModificationSystem，R-Msystem)?答：细菌中有作用于同一DNA的两种酶，即分解DNA的限制酶和改变DNA碱基结构使其免遭限制酶分解的修饰酶。而且，这两种酶作用于同一DNA的相同部位，把这两种酶所组成的系统称为限制与修饰系统。14细菌的限制—修饰系统有什么意义?答：不同种的细菌或不同的细菌菌株具有不同的限制酶和修饰酶组成的限制与修饰系统。修饰的本质是通过甲基化酶将DNA中某些碱基进行甲基化修饰，由于宿主自身DNA上的这些位点进行了修饰，限制酶就不能进行切割。而外来的DNA在相应

8、的碱基上没有被甲基化，宿主的限制酶通过对该位点的识别来分辨敌我，并将入侵的外来DNA分子降解掉。所以DNA限制作用和修饰作用为细胞提供了保护。15说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。答：基本原则：属名+种名+株名十序号。①首字母：取属名的第一个字母，且斜体大写。第二个字母：取种名的第一个字母，斜体小写。第三个字母：取种名的第二个字母，斜体小写。第四个字母：若有株名，株名则作为第四个字母